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TRIzol法提取总RNA反转录和实时定量PCR材料101.pdfVIP

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  • 2019-05-31 发布于天津
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TRIzol法提取总RNA反转录和实时定量PCR材料101.pdf

    法提取总反转录和实时定量实验材料焦碳酸二乙酯氯仿异丙醇的乙醇塑料器材枪头管研磨器材用的水浸泡过夜用锡箔纸包裹后用高压灭菌烘干实验步骤同质化组织需在研体中研磨不断加入液氮将研磨好的样品装入的管中每组织加入细胞加入要吹打均匀液相分离振荡混匀冰上静置分钟每毫升加入微升氯仿体积盖紧盖子充分振荡秒混匀冰上静置分钟静置分层度离心分钟混合物分为下层的红色苯酚氯仿相中间的蛋白质沉淀和上层的无水相即位于上清液水相约占沉淀将上清液转移倒一个新的管中加入等体积的预冷的异丙醇振荡秒混匀冰上静置分钟度离心分钟沉淀为小块洗

    TRIzol 法提取总RNA、反转录和实时定量PCR 实验材料： 1. 0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯) 2. 氯仿 3. 异丙醇 4. 75%的乙醇 5. 塑料器材（枪头，Eppendorf 管），研磨器材用 0.1%的DEPC 水浸泡过夜， 用锡箔纸包裹后用高压灭菌，烘干。 实验步骤： 1. 同质化 50-100mg 组织需在研体中研磨，不断加入液氮，将研磨好的样品装入

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