定量蛋白质组学研究技术..pptVIP

细胞工程教研室 可视同位素标记亲和标签 是在cICAT技术的基础上实现绝对定量的改进方法。 亲和标签试剂由3种不同的同位素标签组成。 用来标记样品的巯基标记标签（VICAT） 标记内标多肽标签（14C-VICAT+6） 等电聚焦标记标签（14C-VICAT-28） 细胞工程教研室 细胞工程教研室 同位素标记相对定量和绝对定量 ICAT技术每次实验只能对两个样品进行相对定量。 新近出现的多重元素标记的同位素标记相对和绝对定量技术（iTRAQ）在一定程度上解决了这一问题。它是2004年由ABI公司推出的一种可以同时对四组样品进行定量分析的方法，对于实验设计比较多组样品给予了有力的支持。 细胞工程教研室 iTRAQ试剂是非多聚体的等质量标记试剂，是由四种试剂组成的一组试剂，这四种试剂的分子量相同。 每一种试剂都包括三部分：一个报告基团（分子量分别为114u、115u、116u和117u）、一个平衡基团（分子量分别为31u、? 30u、29u和28u）和一个与肽段反应的基团。 当我们需要同时比较四组不同样品时，样品分别跟四种iTRAQ试剂结合，然后混合在一起做质谱鉴定。 细胞工程教研室 细胞工程教研室 与ICAT试剂相比优点是通量大。iTRAQ试剂对氨基的标记是一种普遍标记的模式，它的几乎所有的肽段都能被标记。 但是，如果用这种普遍标记的方法来大规模的鉴定和定量蛋白质(理论上说，每个蛋白