黄瓜线粒体类质粒pC12cpC4的转录和同源性分析.pdfVIP

南开大学硕士研究生毕业(学位)论文 前 言 线粒体是细胞中重要的细胞器之一，它不仅是细胞的能量代谢中心，还是 DNA(mtDNA)对于线粒体本身的生物发生意义重大，尽管大多数线粒体蛋白是 由细胞核基因组编码，在细胞质中合成后再运输到线粒体中，但线粒体基因组 仍包含有10％左右的线粒体遗传信息，mtDNA编码的蛋白主要包括呼吸链的 几个主要蛋白，如ATP合成酶、辅酶Q、细胞色素C氧化还原酶等，此外 线粒体的翻译体系中的大多数组份是由mtDNA编码的。 由于对一个细胞内含有两套相对独立的遗传系统的生物学意义的注意和重 视，使与此相关的关于线粒体起源的研究如Altman的“内共生假说”重新又 活跃起来。从而进一步刺激了关于真核细胞起源、原核细胞与真核细胞亲缘关 系的讨论与研究，甚至有人认为，线粒体DNA的多态性可能使线粒体成为研 究进化的新线索，是一个洞悉动、植物进化史的良好手段。 与动物及真菌的线粒体基因组相比，高等植物的线粒体基因组大而且复 杂。动物的线粒体基因组大小为14--39kb，不同物种间变化不太；真菌的线粒 体基因组从17kb到176kb不等：而高等植物的线粒体基因组最小的也有 200kb，大的则达到2400kb，本文所研究的黄瓜的线粒体主基因组大小为 1500kb。在高等植物中，即使是同一科的植物品种，其线粒体基因组的大小差 异也非常大，如葫芦科中的西瓜和甜瓜的mtDNA大小差7-8倍(顾红雅等， 1995)。 随着高等植物线粒体分子生物学的深入研究，有关线粒体基因组的发现越 来越多，其中最令人惊异的是，在高等植物的线粒体中，除了线粒体主基因 组，还有独立于主基因组外的小的核酸分子，这些小核酸分子被认为是独立进 行复制或转录的，它们中少数与线粒体主基因组有同源性，多数与线粒体主基 因组没有同源性，这些小分子与线粒体主基因组的关系好象细菌中质粒与细菌 主DNA的关系一样，因此将这些小核酸分子命名为线粒体类质粒 (mitochondrialDNA)，有的文献中直接称之为线粒体质粒 plasmid．1ike 南开大学硕士研究生毕业(学位)论文 (mitochondrial plasmid)。线粒体类质粒的发现更增加了高等植物线粒体基因 组的复杂性。 目前将线粒体类质粒从性质上分为DNA类质粒和RNA类质粒，其 中DNA类质粒又从形态上分为环形DNA类质粒和线形DNA类质粒。 从1977年线粒体类质粒发现至今，国外有许多实验室对线粒体类质粒进 行了研究，研究内容主要集中在线粒体类质粒的性质、功能、起源、进化、复 molecular biologyofplant 门作为一章进行了阐述。国内关于高等植物线粒体的研究起步较晚，有关线粒 体类质粒的研究报道则更少，截止到现在，我们只检索到一篇相关文献(赖菁 茹等。1992)。本研究室是国内首家对高等植物线粒体DNA类质粒进行系统 研究的实验室。下面分别对线粒体环形DNA类质粒，线形DNA类质粒的研究 ’情况做介绍。 一．线粒体环形DNA类质粒 虽然有文献报道高等植物的线粒体主基因组可以通过重组形成一些环形分 et 子(Bailey—Serresal，1987)，但环形类质粒与这些重组所形成的环形 分子有明显的区别：首先环_形类质粒一般较小，长度在卜2kb，重组所形成的 环形分子较大，在几十kb以上。更为重要的是，环形分子来源于线粒体主基 因组的重组，所以与线粒体主基因组有同源性，而所有已报道的环形类质粒与 线粒体主基因组都不同源，因此，根据以上两点，尽管多数环形类质粒的复制 方式和机制尚不十分清楚，但环形类质粒不可能是线粒体主基因组的亚组份， 而是独立于主基因组外的复制子。 1．环形线粒体类质粒的性质 已报道的环形类质粒共22种，这些环形类质粒的主要性质见表一。 来源于不同植物的环形类质粒在结构和性质上有一些共同的特征： (1) 环形类质粒一般较小，最大的是水稻中的Bl类质粒(2．13kb)，最小的为水 稻中B4类质粒(0．97kb)。(2)所有的环形类质粒均与其线粒体主基因组和 叶绿体基因组没有同源性，大部分环形类质粒与核基因组同源，少数与核基因 组也不