蜡状芽胞杆菌对芘的生物降解及其降解基因的克隆与表达-环境工程专业论文.docxVIP

暨南大学硕士学位论文 暨南大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 摘要 本论文以蜡状芽胞杆菌（Bacillus cereus）为实验菌株，对水体中芘的微生物 修复进行了研究，考察其对芘的降解性能，分析其代谢产物和相关功能基因及功 能酶，以期从分子生物学角度阐明芘在菌体内的降解机理。 B. cereus 降解芘的最优无机盐培养基浓度为：K2HPO4 100 mg·L-1，KH2PO4 100 mg·L-1，MgSO4·7H2O 20 mg·L-1 和柠檬酸钠 100 mg·L-1。在降解体系中加入 1 mg·L-1 Mn2+、0.1 mg·L-1 Fe3+和 10 mg·L-1 葡萄糖混合物对芘的降解有明显促进作 用；1 g·L-1 菌体在 120 h 内对 2.5 μmol·L-1 芘的降解率达到 61.4%。 利用 LC-MS/MS 分析芘代谢产物，检测到 1-萘酚、2-萘酚、9-羟基菲和 1- 羟基芘 4 种单羟基多环芳烃，表明芘在单加氧酶作用下开环降解，且 B. cereus 能有效分解利用 4 种代谢产物，其最高利用率分别为 100%，90.3%，98.3%和 52.7%。酶活力分析实验结果表明，B. cereus 具有的水杨酸羟化酶，邻苯二酚 1,2- 双加氧酶和邻苯二酚 2,3-双加氧酶在芘的降解中起关键作用，其酶活力经芘诱导 后均有明显提高。结合产物分析及酶活测定推断