DNA重组技术的基本工具应用.pptVIP

　 　 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ 小结 ①作用 （二 ）“分子缝合针”——DNA连接酶 把切下来的DNA片段拼接成新的DNA，即将脱 氧核糖和磷酸连接起来. ②作用原理 催化磷酸二酯键形成 G A A T T C C T T A A G A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G ③类型 二 “分子缝合针”——DNA连接酶 类型 来源 功能 相同点 差别 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 大肠杆菌 T4噬菌体 恢复磷 酸二酯 键 只能连接黏性末端 能连接黏性末端和 平末端(效率较低) 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， E·coli DNA连接酶　　　　　　　　或T4DNA连接酶 即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 T4DNA连接酶 T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 相同点 区别 DNA连接酶 DNA聚合酶 寻根问底 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 只能将单个核苷酸连接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯键 形成磷酸二酯键 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 （三）“分子运输车”——运载体 3、种类： 1、需要具备的条件： （1）在受体细胞中稳定存在，能自我复制 （2）有一个或多个切割位点 （3）有标记基因 （4）对受体细胞无害 质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒等 2、载体的作用 将外源基因送入受体细胞。 最常用的质粒——大肠杆菌的质粒 试分析其作为载体的优点？ 基因工程 的工具 限制酶 主要存在于原核生物中 具有专一性(识别序列) 切开DNA分子的磷酸二酯键 DNA连 接酶 连接磷酸二酯键 种类 E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 运载 工 具 具备的 条件 结构简单,大小适中 能在宿主细胞中自 我复制并稳定存在 具一个或多个限制酶切位点 具标记基因 质粒、 λ噬菌体衍生物 、动植物病毒 * 欢迎进入朱建标老师之《生命课堂》 选修三 现代生物科技专题 专题一 基因工程 专题二 细胞工程 专题三 胚胎工程 专题四 生物技术的安全性和伦理问题 专题五 生态工程 选修三 现代生物科技专题 教学目标： 简述DNA重组技术所需要三种工具的作用； 认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新 教学重点： DNA重组技术所需要三种工具的作用 教学难点： 基因工程载体需要具备的条件 课时安排：共3课时 专题一 什么叫基因工程？ 基因工程，又叫DNA重组技术。是指按照人们的愿望，在DNA分子水平上进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 一、基因工程的概念 1、原理： 2、操作水平： 3、又称： 4、优点： 基因重组 DNA分子水平 DNA重组技术或基因拼接技术 ⑴ 定向改造生物性状 ⑵ 克服远缘杂交不亲和的障碍 ⑶ 育种周期短 艾弗里证明DNA是遗传物质，DNA可从一种生物个体转移到另一种生物个体。 二、基因工程的诞生 P2-3 （一）基础理论： 沃森、克里克建立了DNA的双螺旋结构模型 梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制 科技探索之路 克里克等提出 中心法则 DNA RNA 蛋白质 转录 翻译 逆转录 复制 1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明。 1)基因转移载体的发现 2)工具酶的发现 3)DNA合成和测序技术的发明 4)DNA体外重组的实现 5)重组DNA表达实验的成功 6)第一例转基因动物问世 7)PCR技术的发明 （二）技术发明： 三、 DNA重组技术的基本工具 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 在以上过程中关键步骤或难点是什么？ 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 通过运载体导入 转基因棉花含抗虫基因 转基因棉花产生伴胞晶体 转基因棉花有抗虫特性 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三： 抗虫基因进入棉花细胞 “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”—— 基因进入受体细胞的载体 三、 DNA重组技术的基本工具 ㈠限制性核酸内切酶——“分子手术刀” ①来源： 主要从原核生物中分离纯化出来。 ②种类：