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期前收缩与代偿间歇及蛙心灌流 姓名： 学号： 班级： 实验目的 通过观察在心脏活动的不同时期给予刺激，心脏所作的反应，来验证心机兴奋性阶段性变化的特征。 制作蛙类离体心脏模型，观察离体蛙心的活动情况。 观察各种理化因素对离体蛙类心脏活动的影响。 实验材料 实验动物：蟾蜍 器材：蛙类手术器械，玻璃分针，刺激电极，张力换能器，蛙心夹，铁支架，双凹夹，滴灌，蛙板，蛙钉，毁髓针，蛙心插管，试管夹，棉线，烧杯，滑轮，生物信号采集处理系统。 药品：任氏液，0.65%NaCl溶液，2%CaCl2溶液，1%KCl溶液，1:10000肾上腺素溶液，1:100000乙酰胆碱溶液。 实验方法和步骤 期前收缩与代偿间歇 毁髓 取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓。 暴露心脏 将其仰卧固定于蛙板上，从剑突下将胸部皮肤向上剪开（或剪掉），然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏。 连接试验装置 将与张力换能器相连的蛙心夹在心室舒张期夹住心尖。 将刺激电极固定，使其两极与心室相接处，以不影响心室正常收缩和舒张为宜。 观察项目 描记正常蛙心的搏动曲线，分清曲线的收缩相和舒张相。 用中等强度的单个阈上刺激分别在心室收缩期和舒张早期刺激心室，观察能否引起期前收缩。 用同等强度的刺激在心室舒张早期之后刺激心室，观察有无期前收缩出现。 刺激如能引起期前收缩，观察其后是否出现代偿间歇。 蛙心灌流 毁髓 取蟾蜍，损毁脑和脊髓。 暴露心脏 仰卧位固定蟾蜍，胸骨处剪开胸壁，暴露心脏，剪破心包。 离体蛙心的制备 辨认心脏结构与大血管分布，结扎右主动脉。 左右主动脉下方穿线后将心尖向头侧翻起，结扎静脉。 左主动脉远心端结扎，近心端打活结，做“V”形切口，奖盛有少量任氏液的蛙心插管经切口插入心室，可见插管内液面上下波动，左右主动脉处打结并固定于插管侧钩。 清除心室内余血。 结扎线远端剪断血管，蟾蜍心脏离体。 连接实验装置 用试管夹将蛙心插管固定资啊铁支架上，在舒张期使用连有棉线的蛙心夹夹住心尖。 棉线经定滑轮连接至张力换能器，连接电脑。 观察项目 描记正常蛙心搏动曲线：观察心率和心脏收缩幅度。 不同离子对蛙心活动的影响。 使用等量0.65%NaCl溶液更换任氏液，观察蛙心搏动曲线的变化。待效果明显后，使用任氏液反复冲洗，使心脏搏动恢复正常，开始下一项实验。 等量新鲜任氏液中滴加1~2滴2%CaCl2溶液，混匀，观察蛙心搏动曲线的变化。 等量新鲜任氏液中滴加1~2滴1%KCl溶液，混匀，观察蛙心搏动曲线的变化。 神经递质对蛙心活动的影响。 等量新鲜任氏液中滴加1~2滴1:10000肾上腺素溶液，混匀，观察蛙心搏动曲线的变化。 等量新鲜任氏液中滴加1~2滴1:100000乙酰胆碱溶液，混匀，观察蛙心搏动曲线的变化。 实验结果 1、正常蛙心的搏动曲线 2、心室舒张期刺激心室 3、蛙心灌流-任氏液 4、蛙心灌流-0.65%NaCl溶液 5、蛙心灌流-2%CaCl2溶液 6、蛙心灌流-1%KCl溶液 7、蛙心灌流-1:10000肾上腺素溶液 8、蛙心灌流-1:100000乙酰胆碱溶液 实验讨论 期前收缩与代偿间歇发生机制 心室肌细胞在一次兴奋过程中兴奋性的周期性变化（表1） 引起0期去极化的离子通道性状：引起心肌细胞0期去极化的I Na+通道有关闭、激活和失活三种功能状态。当通道均处于静息态时，细胞具有正常的兴奋性；而当例子通道处于失活态时，细胞的兴奋性完全丧失；在复活过程中，随着处于静息态的通道数量的增加，细胞的兴奋性也逐渐恢复。 分期 膜内电位 兴奋性 特点 机制 有效不应期 绝对不应期 0~3期膜内电位为-55mV 完全丧生 任何刺激不会引起肌膜产生任何程度的去极化 Na+通道处于激活或失活状态 局部反应期 3期膜内电位-55~-60mV 极低 强大刺激可引起肌膜发生局部反应，但不能引起动作电位 少量Na+通道复活，其开放不足以引起动作电位 相对不应期 3期膜内电位-60mV~-80mV 低于正常 某些阈上刺激可引起动作电位的产生 复活至关闭的Na+通道数量未达到静息电位时的水平 超长期 3期膜内电位-80~-90mV 高于正常 某些阈下刺激也可引起动作电位的产生 Na+通道基本上恢复到关闭状态，膜电位与阈电位的差距小 表1. 心室肌细胞在一次兴奋过程中兴奋性的周期性变化【1】 图1. 心室肌细胞在一次兴奋过程中兴奋性的变化及其机械收缩的关系 （a：绝对不应期 b：局部兴奋 a+ b：有效不应期 c：相对不应期 d：超长期） 期前收缩与代偿间歇 期前收缩：如果在有效不应期之后到下一次窦房结兴奋传来之前受到窦房结以外的额外刺激，可提前产生一次兴奋和收缩，分别称为期前兴奋和期前收缩。在相对不应期，由于Na+通道未完全恢复到关闭状态，此期所产生的动作电位（即