生物一轮复习动物细胞工程.pptxVIP

2016生物一轮复习34讲;单克隆抗体 ;1.动物细胞培养的条件;动物细胞生长特性：;■细胞贴壁生长：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长，称为细胞贴壁。;;原代培养：培养第1代细胞到10代细胞 传代培养：从10代培养到40－50代细胞 细胞株：从10代到40－50代的细胞，遗传物质不变 细胞系：50代以后的细胞，遗传物质改变，具有癌变的特点，能无限增殖;胰蛋白酶处理？;思考与讨论;5.植物组织培养和动物细胞培养的比较;细胞A;3.植物体细胞杂交和动物细胞融合比较;1.单克隆抗体概念：;技术原理：;;;①整个制备过程为何要经过两次筛选? ②为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ ③会有几种融合方式？ ④是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？;通过恰当的稀释达到分离单个细胞进行培养的目的。 （1）取出阳性孔的细胞数进行计数 （2）用培养液将其稀释到10Cell／ml （3）如果在多孔板，每孔加0.1ml，其几率为每孔内落入一个细胞 （4）根据检测的阳性结果可进行克隆化;;4.单克隆抗体的应用：;用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体制备成“早早孕诊断试剂”。 受精后不久，胎盘滋养层细胞会分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG)，是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，在妇女的尿液中大量存在，而非妊娠妇女尿液中几乎没有。;早孕试纸利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体为配体，固定在层析住上，以胶体金为指示标记，检测尿液中HCG浓度，来确定妇女是否怀孕。 阳性：出现两条红色条带，一条位于对照区C，另一条位于检测区T，表明已怀孕。 阴性：仅在对照区C出现一条红性条带，在检测区T无红色条带出现，表明未怀孕。 无效：5分钟内在对照区C无红色条带出现，则测试失效或试纸已失效。;甲胎蛋白（AFP）是一种特异性较强的肿瘤标志物，用甲胎蛋白作为抗原免疫小鼠，制备抗AFP单抗，并与含有放射性同位素的标记物连接，单克隆抗体携带放射性标记物通过全身血液循环运送到所有组织，由于肿瘤细胞表面的AFP会和单克隆抗体特异性结合，所以放射性同位素标记物就不断积累在肿瘤上，通过一定的显影技术就可发现肿瘤所在。;生物导弹：用癌细胞作为抗原，免疫小鼠制备抗癌细胞的单克隆抗体，并与抗癌药物连接，便制成了生物导弹，注入患者体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了药剂用量。;; 二.动物体细胞核移植和克隆动物;（2）为什么受体细胞是卵细胞？;卵细胞;试管动物（婴儿）培养过程;;1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？;（三）体细胞核移植技术的应用;1、畜牧业方面：;（四）体细胞核移植技术存在的问题;1．进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是（ ） A．衰老退化的动物组织细胞 B．成熟动物个体的体细胞 C．动物的受精卵细胞 D．动物胚胎或幼龄动物个体的细胞 2．为使培养的动物组织细胞分散开，以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取的动物组织进行处理时应首先选用下列物质中的（ ） A．胃蛋白酶 B．胰蛋白酶 C．盐酸 D．胰脂肪酶;3．获得大量单克隆抗体必须用单个的B细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应 C．在???物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 4．在动物细胞培养中，有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称为（ ） A．原代细胞 B．传代细胞 C．细胞株 D．细胞系; 5．关于制备单克隆抗体的叙述正确的是 A、单克隆抗体产自淋巴细胞 B、单克隆抗体的制备要经过细胞融合 C、单克隆抗体的获得不需要使细胞癌变 D、诱导融合的手段相同 6．①试管婴儿②试管苗③克隆羊 这三者可以说是现代生物工程技术的杰出成就，它们的诞生所依据的生物学原理最接近的是 A、①② B、②③ C、①③ D、①②③ ;（1）该方案能达到预期效果吗? 。原因是？ （2）图中②为 过程，常用 诱导剂。该细胞继承了____________。 （3）图中③进行细胞培养，目的是 。 （4）图中④的细胞培养，能获得 细胞，便于大规模培养。 （5）破伤风杆菌的抗体最终可从 和 中提取。