雷帕霉素通过下调DNA和RNA聚合酶抑制前B急淋白血病细胞的生长-发育生物学专业论文.docxVIP

雷帕霉素通 雷帕霉素通过下调 DNA 和 RNA 聚合酶抑制前 B 急淋白血病细胞的生长 中文摘要 I I PAGE PAGE IV 中文摘要 目的：探究雷帕霉素(Rapamycin，Rap) 对于前 B 淋巴细胞白血病（Pre-B acute lymphoblastic leukemia，B-ALL）细胞生长的影响，并探讨其作用机制。 方法：（1）雷帕霉素处理B-ALL细胞系697细胞,分别通过苔盼兰染色细胞计 数 、 CCK-8 试剂盒 、 CFSE 荧光染色以 及 PI 染色流式 细胞 仪 分析 （ Flow Cytometry,FCM），分析雷帕霉素对697细胞生长、细胞活性、增殖和细胞周期的 影响。 （2）用 PI/Annexxin-Ⅴ双染法检测雷帕霉素处理后 697 细胞的凋亡水平，并 构建 697-GFP-LC3 稳转细胞系，用免疫荧光（Immunofluorescence，IF）和 Western blotting 检测 Rap 处理后的细胞自噬以及 mTOR 信号。 （3）用细胞周期 RT2 Profiler? PCR Array 检测 Rap 处理后细胞周期相关因子 的变化。 （4）用甲基绿-派洛宁染色流式法检测 Rap 处理后细胞内 DNA 和 RNA 的含 量变化,并用荧光定量 PCR（Quantitative Real-time PCR，Q-RT-P