DHPLC相关技术在重大出生缺陷基因诊断.pptVIP

DHPLC技术在重大出生缺陷 基因诊断中的应用进展 刘敬忠 首都医科大学附属北京朝阳医院 基因诊疗中心 北京朝阳医院法医物证司法鉴定所 北京基因诊断实验室遗传病分部 出生缺陷包括各种单基因遗传病，多基因遗传病，染色体数目或结构异常引起的病，以及各种尚不明原因的先天性疾病等。重大出生缺陷的诊断、筛查及治疗已引起国家及全社会更进一步的高度重视。 DHPLC这一技术平台已经得到越来越多的应用。尤其是由于其能快速、简便地检测、筛查基因突变、SNP，包括已知的和未知的突变，因此正泛用于突变引起的多种单基因遗传病、癌症的研究,检测等等。 本人要重点介绍的是DHPLC另一类重要应用：就是应用于DNA片段大小的分析，和基因剂量或基因拷贝数检测、分析。这类检测并不需变性，而是在非变性条件下，运用离子对反相液相色谱原理，即可将长度不同的DNA片段分开，同时对每个产物峰进行定量测定，给出峰高或峰面积 用DHPLC分离分析不同大小的DNA，分析的精确度很高，一般来说DNA分子量的1%大小的区别能够分离开。例如100bp的DNA能与101bp的片段分开，300bp的DNA片段能与303bp的片段分成2个峰。仪器的软件（WAVE专用TM）能自动给出每个片段的bp数。在这种工作模式下，DHPLC可以用于PCR产物质量检测，纯化，不同大小片段的分离制备，STR多态性及连锁分析，微卫星