微生物与生物地球化学循环-科学网—博客.ppt

有机氯农药微生物降解 2001年来自127个国家(包括中国)和地区的代表在瑞典斯德哥尔摩签署了“控制持久性有机污染物”的国际公约，严格禁止或限制使用12种持久性有机污染物(persistent organic pollutants，POPs)。有机氯农药(DDT、艾氏剂、氯丹、狄氏剂、异狄氏剂、七氯、灭蚁灵、毒杀芬、六氯苯)就占了其中的9种。这些对人类健康和自然环境特别有害的典型化学污染物不仅可能引起癌症，而且可能影响内分泌系统、神经系统和生殖系统；不但可能影响本代，而且可能影响后代。HCH虽未列上，但为可疑致癌物，属美国环境保护局确定的129种优先控制污染物。 六六六(hexaehloroeyelohexane，HCH or BHC)化学名称为六抓环己烷；化学式为C6H6C16；是一种有机氯杀虫剂，曾经在世界范围内广泛使用。由于其具有高度稳定性，在环境中难以被降解，所以被联合国列为全球禁止使用的农药。 HCH有八种构象异构体。在商业化的六六六产品中，α、β、γ、δ四种异构体占主要成分。通常我们所说的六六六异构体主要就是指这四种异构体，其他四种异构体因为含量极少又不重要，一般不包括在所谓的六六六总量内。 农药微生物降解的发展方向 高效降解微生物菌株的筛选； 降解菌株的混合培养； 高效农药降解微生物酶制剂的开发； 高效降解工程菌的构建； 降解菌或酶的固定化技术。 高效降解菌株 南京农业大学目前分离筛选到农药和有毒有机污染物降解的微生物菌种资源500株以上，农药降解效率国际领先的菌株30余株，建立了种类齐全的我国最大的农药降解菌种库，能降解的农药有有机磷、有机氮、有机氯、菊酯类、氨基甲酸酯、磺酰脲类等农药。 2 h内完全矿化5mg/L的α、β、γ、δ四种六六六异构体。此前，国际报道的S. paucimobilis UT26只能降解α 和γ 两种异构体，完全矿化γ 需要4h，20h才能降解12.6%的α异构体。 六六六降解菌BHC-A（Sphingomonas sp.） 处理（农药+降解菌） 对照（农药） 发现使用六六六降解菌可以在15d内将30 mg/kg 的α、β、γ、δ四种六六六异构体降解低到0.33 mg/kg 降解菌株的盆钵试验 DDT降解菌株 DB-1 （Sphingomonas sp.） 菌株DB-1的电镜照片 对 照 处 理 DDT降解的紫外扫描图谱 10 d DDT的降解率在75.7-83.6%之间。而国外报道的菌株（Cladosporium sp.）要达到相同的降解率的时间长达30d。 呋喃丹农药降解菌CDS-1（Sphingomonas agerus ） 24h内矿化100 mg/kg的呋喃丹，国际报道的同类菌株需15d。 阿特拉津降解菌ADP-1（Micrococcus sp.） 24 h内完全矿化100 mg/kg的阿特拉津 发现使用阿特拉津降解菌可以明显解除阿特拉津除草剂对小麦生长的抑制。 空白 阿特拉津(1.5mg/kg土) 阿特拉津+菌剂（1亿个/g 土） 24h内完全矿化500mg/kg的甲基对硫磷，效果稳定，降解谱广，能降解对硫磷、辛硫磷、马拉硫磷、敌敌畏、乐斯本等有机磷农药。 甲基对硫磷降解菌DLL-1（Pseudomonas putida） 三唑磷降解菌mp-4（Ochrobactrum sp.） 国际首次报道能降解三唑磷的高效菌株，大田水稻上的三唑磷农药降解效果90%以上。 菊酯类农药降解菌 甲氰菊酯富集液 92.15% 甲氰菊酯CK 甲氰菊酯处理 氯菊酯富集液 99.28% 氯菊酯CK 氯菊酯处理 氰戊菊酯富集液 55% 氰戊菊酯CK 氰戊菊酯处理 溴氰菊酯富集液 89.10% 溴氰菊酯CK 溴氰菊酯 处理 培养36hr完全降解100ppm的多菌灵农药 多菌灵农药降解菌 基因工程菌构建 近年来，伴随着基因工程和分子生物学研究技术的发展，科研工作者开始把重心转移到高效工程菌的构建，采用基因重组技术，将表达高效降解农药的酶的基因构建到载体中，经转化获得工程菌，以期提高起降解作用的特定蛋白质或酶的表达水平，从而提高降解效率,既能克服一些酶在环境中不能稳定存在的问题，又保持了酶的高活性。随着基因工程进一步发展，微生物在农药降解方面的潜力会得到更充分的体现。 从甲基对硫磷降解菌M6中克隆到一个新的甲基对硫磷水解酶基因mpd(AF338729)； 甲基对硫磷降解关键酶基因的克隆与表达 mpd