实验核医学体外分析技术.ppt

化学发光免疫分析 Chemiluminescence immunoassay,CLIA 碱性磷酸酶 发光 发光底物 Dioxetane 光电倍增管 测量光强度 ALP标记Ag 或Ab，形成 Ag.Ab反应 去除游 离部分 温育 分竞争法和夹心法两类 美国拜耳公司化学发光仪 化学发光免疫竞争法： 待测抗原 + + 化学发光 标记抗原 抗体包被磁粒 + + + 抗体包 被磁粒 待测 抗原 形成抗原- 抗体复合物 化学发光标记抗体 形成抗体-抗原- 标记体原复合物 + 化学发光免疫夹心法： 时间分辨荧光分析 Time-resolved fluoroimmunoassay,TrFIA 300 400 500 600 0 0.4 0.6 0.8 0 10 20 30 40 波长nm 激发 发射 荧光密度 0.2 Eu 荧光 激发 铕解离出形 成新螯合物 新螯合物在保 护微膜内形成 H2O Ab-Eu +增强液 非放射免疫分析与体外放射分析的比较 优点： 试剂稳定，有效使用期长，可达6～12月 灵敏感度高，可达10-14－18g 标准曲线稳定，可达2～4周，节省试剂 自动化程度高，减少加样误差 出结果迅速，适合急诊检测 缺点： 仪器及试剂成本较放免高，试剂与仪器不能兼容。 内分泌系统 甲状腺激素及有关激素：TT3、TT4、FT3、FT4、rT3、 TSH、 TRH 甲状腺自身抗体与抗原：TgAb、TmAb、TPOAb、TsAb、Tg 甲状旁腺激素、降钙素、骨钙素等 胰岛素、胰高血糖素、C肽 肾上腺及有关激素：皮质醇、醛固酮、ACTH等 性腺及生殖系统 垂体激素：LH、FSH、PRL 性腺激素：E2、E3、睾酮、孕酮 生殖激素：胎盘催乳素、绒毛膜促性腺激素等 心血管系统 心钠素、肌红蛋白、地高辛、肾素、血管紧张素、内皮素 神经系统 β内啡肽、生长激素、神经元特异烯醇酶(NSE) 血液系统 红细胞生成素、铁蛋白、血栓素、前列腺素 消化系统 CEA、AFP、乙型肝炎抗原及抗体、肝胆酸、胃泌素、胃动素等 泌尿系统 β2-MG、尿白蛋白、TH糖蛋白、分泌型免疫球蛋白A(SIgA) 肿瘤疾病及其它 CEA、CA-50、CA-199、CA-125、CA-153、前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺酸性磷酸酶(PAP)、铁蛋白、肿瘤坏死因子、SOD等。 国内常用的体外放射分析技术检测项目及其临床意义一览表 图像前期处理与后期制作：李芳巍 界面设计与多媒体制作：李芳巍 牡丹江医学院红旗医院 影像学系核医学教研室 实验核医学 Experimental nuclear medicine 体外分析技术 In Vitro Radioassay 体外分析技术 In Vitro Radioassay 结束 一、体外放射分析技术 二、非放射免疫分析技术 三、临床应用 一、体外放射分析的概念和分类 体外放射分析 二、放射免疫分析（RIA) 三、免疫放射分析（IRMA) 1、基本原理 2、必备条件 3、质量控制 四、核射线探测相关内容 体外放射分析 (In Vitro Radioassay) 1、概念： Definition 在体外条件下 In vitro 以放射性核素标记的配体为示踪剂 Tracer 以结合反应为基础 Base 以放射性测量为定量手段 Means 对微量生物活性物质进行定量分析 Quantitative analysis 一类分析方法的总称。 General name 2、分类：按照抗原－抗体结合反应为基础分为：放射免疫分析Radioimmunoassay ; RIA免疫放射分析Immunoradiometric Assay ；IRMA 按照是否竞争结合分为：Competive binding analysis 放射免疫分析、放射受体分析、蛋白质竞争结合分析、放射酶促分析等。Non-competive binding analysis 免疫放射分析、受体放射分析、酶的放射化学测定、酶的激活剂或抑制剂测定法等。 一、竞争性蛋白质结合分析法(Competitive Protein Binding Assay；CPBA)　　本法不需要抗体，用血浆或其他生物组织中存在的特异结合蛋白质作为结合剂对某些物质进行微量分析。方法简便，但其灵敏度较RIA低。二、放射受体分析法(Radioreceptor Assay；RRA)　　用细胞