品红亚硫酸分光光度法原理.ppt

3.去除样品液中脂肪的净化技术、原理 ①皂化法（适用于碱性条件下稳定的待测物） 利用强碱（NaOH、KOH）与脂肪发生皂化反应（水解反应），生成可溶于水的甘油和脂肪酸盐，除去脂肪，使样品提取液得到净化。 ②磺化法（要求待测物对浓硫酸稳定，如有机氯农药） 利用浓硫酸与脂肪反应（磺化或加成）生成可溶于H2SO4和水的强极性化合物，除去脂肪，使样品提取液得到净化。 ③固相萃取法 使用商品固相萃取小柱来进行样品提取液净化浓缩的方法。 工作原理与柱色谱法相似。 集萃取、净化、浓缩于一步，具有缩短分析时间，降低成本，节省有机溶剂，可实现半自动化、全自动化操作。 由于是商品化生产，固相萃取小柱规格统一，装填均匀，操作方便，易于控制，所以该方法重现性好。 ④凝胶渗透色谱 工作原理与常见的色谱分离不同，GPC是一种按分子量大小来进行分离净化的样品前处理技术。大分子量的物质先流出，小分子量的物质后流出。 常用于除去样品处理液中脂肪和分子量相对较高的杂质，常用的淋洗剂有环己烷－二氯甲烷、甲苯－乙酸乙酯、二氯甲烷－丙酮、乙酸乙酯－环己烷等。 4. 有机氯、有机磷2类农药的测定方法 （一）有机氯农药残留量的检验 原理：试样经净化后用气相色谱-电子捕获检测器测定与标准对照，通过保留时间定性，峰高或峰面积定量。 （二）有机磷农药残留量的检验 原理：样品经处理后，有机磷农药组分经气相色谱柱分离进入火焰光度检测器（FPD），在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式发射出526nm的特征光谱。检测该波长光线的强度，用色谱峰保留时间定性，峰高或峰面积定量。 第八章 霉菌毒素检验 霉菌毒素检验的检测对象：与食品卫生关系密切的霉菌大部分属于曲霉菌属、青霉菌素和镰刀菌属。（黄曲霉毒素 、杂色曲霉素、赭曲霉毒素、伏马菌素、展青霉素、桔青霉素、单端孢霉烯族化合物、玉米赤霉烯酮） 霉菌属的类别：按毒素的作用部分分为肝脏毒素、肾脏毒素、神经毒素、类似性激素作用物质； 按毒素来源分为曲霉毒素类、青霉毒素类、镰刀菌毒素类 按作用机理分为抑制蛋白质合成类、作用于离子通道类、作用于细胞突触类 按毒素化学结构分为二呋喃环类、内酯环类、醌类 3、黄曲霉毒素的检验 1.薄层色谱法原理 样品中AFTB1经甲醇-水溶液提取后，浓缩、定容、点样于硅胶G薄层板上，在UV365nm下产生蓝紫色的荧光，根据其在薄层板上显示荧光的强度与标准比较，据Rf值定性，最低检出量法定量。 2、酶联免疫吸附法--间接竞争法 原理：将已知抗原吸附在酶标微孔板表面，洗除未吸附的抗原，加入一定量抗体与待测样品（含有毒素抗原）提取液的混合液，竞争孵育后，在固相载体表面形成抗原抗体复合物。洗除多余抗体成分，然后加入酶标记的第二抗体，与吸附在固体表面的抗原抗体复合物相结合，再加入酶的底物，在酶的催化作用下，底物发生反应，生成有色物质，根据样品与标准的吸光度值，计算样品中抗原（AFTB1）的含量。 第九章 食品中其他化学污染物的检验 食品中铅、砷、汞、镉常用检测方法 食品中铅的检验 食品中砷的检验 石墨炉原子吸收光谱法 氢化物发生原子荧光光谱法 氢化物发生原子荧光光谱法 银盐法 火焰原子吸收光谱法 硼氢化物还原光度法 二硫腙分光光度法 食品中汞的检验 食品中镉的检验 原子荧光光谱法 石墨炉原子吸收 冷原子吸收光谱法 火焰原子吸收法 二硫腙比色法 原子荧光法 光谱法 ⑥—般消化至呈透明后，继续消化30分钟即可，但对于含有特别难以氨化的氮化合物的样品．如含赖氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸或脯氨酸等时，需适当延长消化时间。有机物如分解完全，消化液呈蓝色或浅绿色，但含铁量多时，呈较深绿色。 ⑦若取样量较大，如干试样超过5g可按每克试样5 mL的比例增加硫酸用量。 ⑧ 蒸馏装置不能漏气，蒸馏前应检查气密性。 ⑨ 蒸馏前若加碱量不足，消化液呈蓝色不生成氢氧化铜沉淀，此时需再增加氢氧化钠用量。 ⑩蒸馏完毕后，应先将冷凝管下端提离吸收液液面，清洗管口后再蒸1min后关掉热源．否则可能造成吸收液倒吸。 5索氏提取法测定粗脂肪 原理：在索氏抽提器中，用有机溶剂如乙醚、石油醚等提取样品中的脂肪，称残留物的质量，根据样品提取前后的质量差来确定样品的脂肪含量。 注意事项： ①样品需先粉碎和干燥，因为水分的存在使有机溶剂不能进入食品内部，另外被水分饱和的乙醚提取效率降低。 ②滤纸筒一定要严密，不能往外漏样品，但也不要包得太紧以免影响溶剂渗透。放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管。 ③在抽提时，冷凝管上端最好连接二个氯化钙干燥管，这样可防止空气中水分进入，也可避免乙醚挥发在空气中。 ④抽提是否完全，可凭经验，也可用滤纸或毛玻璃检查，由抽提管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下油迹表明已抽提完全，若留下油迹说明抽提不完全。 ⑤无水