化妆品及其原料中二乙氨基羟苯甲酰基苯甲酸己酯的检测方法.docVIP

PAGE PAGE 12 附件1： 化妆品中氢化可的松等7种禁用物质的检测方法 （征求意见稿） 1 适用范围 本方法规定了采用液相色谱-串联质谱法测定化妆品中7种禁用物质：米诺地尔（CAS：38304-91-5），氢化可的松（CAS：50-23-7），螺内酯（CAS：52-01-7），雌酮（CAS：53-16-7），坎利酮（CAS：976-71-6），醋酸曲安奈德（CAS：3870-07-3），黄体酮（CAS：57-83-0）的方法。 本方法适用化妆品中禁用物质：米诺地尔，氢化可的松，螺内酯，雌酮，坎利酮，醋酸曲安奈德，黄体酮含量的测定。 2 方法提要 样品经过提取后，用液相色谱-串联质谱法测定，以多反应离子监测模式进行监测，采用特征离子丰度比进行定性，待测化合物峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法的检出限、定量限和取样品1 g时的检出浓度、定量浓度见表1. 表1 各违禁成分的检出限和检出浓度 化合物 检出限 （ng） 定量限 （ng） 检出浓度 (ng/g) 定量浓度 (ng/g) 米诺地尔 0.5 1 10 25 氢化可的松 1 2 25 50 螺内酯 0.5 1 25 50 雌酮 50 100 500 1000 坎利酮 0.5 1 10 25 醋酸曲安奈德 0.1 0.2 5 10 黄体酮 0.2 0.5 10 25 3 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。 3.1 乙腈，色谱纯。 3.2 甲醇，色谱纯。 3.3 乙腈溶液[φ（乙腈）= 90%]：量取10 mL水于100 mL量瓶中，加乙腈（3.1）稀释至刻度，混匀。 3.4 混合标准储备溶液[r（待测成分）= 1 mg/mL]： 精密称取米诺地尔，氢化可的松，螺内酯，雌酮，坎利酮，醋酸曲安奈德，黄体酮标准品10 mg（精确到0.01 mg）置于同一10 mL量瓶中，加甲醇（3.2）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为1 mg/mL的混合标准储备溶液。 3.5 系列浓度标准溶液：用90%乙腈（3.4）稀释混合标准储备溶液，精密配制得质量浓度为10，20，50，100，200，500，1000，1500 ng/mL的系列浓度标准溶液。 4 仪器 4.1 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。 4.2 分析天平：感量0.001 4.3 超声波清洗仪。 4.4 离心机 4.5 涡旋混合仪 5 测定步骤 5.1 样品处理 准确称取样品约1.0 g（精确至1 mg），置于10 mL比色管中，加入1mL饱和氯化钠溶液，涡旋30s后加入乙腈，定容至刻度，涡旋30 s，超声提取30 min，涡旋1 min，4500 rpm离心5 min，取上清液经0.45 μm微孔滤膜过滤后，滤液作为待测液备用。 5.2 液相色谱-三重四极杆质谱联用分析条件 5.2.1 色谱条件 色谱柱： Waters Symmetry C18 (3.5 μm, 2.1*150mm)或同等柱效色谱柱； 流动相：溶液A：0.2%甲酸水，溶液B：甲醇（含0.2%甲酸），梯度程序见表2 表2 流动相的梯度程序 时间（min） 溶液A（%） 溶液B（%） 0 95 5 2 75 25 4 45 55 11 20 80 18 10 90 流速：0.3 mL/min； 柱温：30 进样量：5 μL。 5.2.2 质谱参考条件 离子源： 电喷雾离子源（ESI源）； 监测模式： 正离子监测模式； 监测离子对及相关电压参数设定见表3 喷雾压力： 40 psi； 干燥气流速： 8 L/min； 干燥气温度： 325 毛细管电压： 4000 V； 0 – 3.5 min：不进入质谱仪分析, 3.5 – 18 min：进入质谱仪分析。 表3 三重四极杆离子对及相关电压参数设定表 编号 物质名称 母离子（m/z） Frag.(V) 子离子（m/z） CE（V） 1 米诺地尔 210．0 110 193.2 10 110 164.1* 25 2 氢化可的松 363.1 125 327 10 125 121* 25 3 螺内酯 341.1 147 107.1* 35 165 90.9 65 4 雌酮 271.2 105 253.1* 5 105 132.8 22 5 坎利酮 341.1 147 107.1* 35 165 90.9 65 6 醋酸曲安奈德 477.1 100 457.2* 5 100 439.1 10 7 黄体酮 315.2 140 109 25 140 97* 23 *：定量离子对 5.3 定性判定 用液相色谱-串联质谱法对样品进行定性判定，在相同试验条件下，样品中被测禁用物质的质量色谱峰保留时间与标准溶液中对应物质的质量色谱峰保留时间一致；样品色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比