河南大学医学院试验教案-生物化学与分子生物学教研室.doc

河南大学医学院实验课教案首页 实验名称 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响 授课对象 04级药学2班、05级护理1班 教学目标 学时分配 大体内容与时间安排：(3学时) 掌握多种因素对酶促反应速度的影响。 讲授时间10分钟 学会熟练运用吸量管并及时观察实验现象并记录。 讲授时间10分钟 学生操作时间140分钟 授课重点 多种因素对酶促反应速度的影响 授课方法 课前准备 讲授为主，结合提问、总结，指导纠正，结合学生实验中出现的问题及时指导。 教材 《生物化学实验指导》 刘玉庆 主编 人民卫生出版社 教研室审查意见 主任签字 授课教师姓名及职称： 日期： 河南大学医学院实验课教案 实验名称 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响 实验目的 加深对酶性质的认识；掌握温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响的原理。 实验原理 唾液淀粉酶对淀粉的水解过程是“淀粉—糊精—麦芽糖”，淀粉和糊精遇碘溶液可产生蓝色和紫红色，而麦芽糖遇碘不显色。因此根据不同的颜色，就可了解淀粉酶水解的程度。由于在不同温度或酸碱度下，酶活性高低不同，所以在同一时间内淀粉被水解的程度也不一样。还有淀粉酶遇激活剂或抑制剂时，酶活性也不同，以致影响了淀粉被水解的程度。因此，通过与碘产生不同的颜色，可以了解温度、pH、激活剂与抑制剂对酶促反应的影响。 基本操作 仪器介绍 基本操作：吸量管的运用，观察、分析、记录实验现象。 设备：恒温水浴锅 实验步骤 一、温度对酶活性的影响?? 1、唾液的收集 2、水浴的准备 3、实验的准备 取3只试管按表操作 试剂 1 2 3 煮沸唾液（d） 5 － － 唾液（d） － 5 － 冰浴唾液（d） － － 5 1％淀粉（ml） 1 1 1 [分析与思考]　 分析三管中颜色不同的原因 二、pH对酶活性的影响?? 1、唾液的收集 2、取3只试管按表操作 试剂 1 2 3 缓冲液（pH） 5 7 9 唾液（d） 2 2 2 1％淀粉（ml） 2 2 2 3、混匀后将3管放入37℃ 4、当任何一管遇碘呈红色或不变色时，立即取出3管加入6滴碘液，混匀，观察颜色有何不同，解释结果。 三、激活剂与抑制剂对酶活性的影响1、准备试管5支，按表操作。 试剂（ml） 1 2 3 4 5 蒸馏水 1 2 1 1 － 1％NaCl 1 － － － 1 1％CuSO4 － － 1 － 1 1％淀粉 1 1 1 1 1 1％Na2SO4 － － － 1 － 唾液（d） 1 1 1 1 1 2、充分混匀，置于37℃ 注意事项 所有仪器洗净后用蒸馏水冲洗（因自来水中含有氯离子） 思考题 1、影响酶促反应速度的因素有那些？ 2、举例说明温度、pH对酶活性的影响？ 实验后记 本实验操作属于基本操作，学生操作比较熟练，应注意引导学生学会及时观察实验现象并记录。