细胞融合-小鼠骨髓瘤SP20细胞与小鼠脾细胞融合.pptVIP

实验八 细胞融合----- 小鼠骨髓瘤SP2/0细胞与小鼠脾细胞融合 一、实验目的 了解细胞融合的原理 掌握细胞融合的基本方法 细胞融合的概念 二、实验原理 病毒诱导融合 聚乙二醇诱导融合 电场诱导融合 激光诱导融合 常用的诱导融合手段有哪些？ 二、实验原理 细胞融合的概念 三、仪器、材料与试剂 仪器： 离心机、 CO2培养箱、超净台、 37℃恒温水浴锅、显微镜、血球计数板、解剖器械、烧杯、载玻片、盖玻片、离心管。 材料： SP2/0细胞、昆明小鼠 试剂： Hanks液、45%PEG ，75%乙醇 四、实 验步骤 （1）小鼠摘眼球放血（可不做）, 拉颈 处死，浸泡在75%酒精内，3～5min （2）无菌取脾脏， Hanks液洗一次，脾脏剪碎，培养液洗 一次，过不锈钢筛网，转移至10mL离心管 （3）800g 离心10分钟，取沉淀细胞用Hanks液洗2次（每次加入5mL溶液，轻轻混匀800g 离心10分钟） （4）细胞计数，待用。 （5）取对数生长骨髓瘤细胞， 800g 离心10分钟，取沉淀细胞用Hanks液洗2次（每次加入5mL Han