在幼年大鼠脑膜炎脑水肿模型中AQP4的表达变化及内化.docVIP

幼年大鼠脑膜炎脑水肿模型中AQP4的表达变化及内化 黄 娟1，2， 陆蔚天1,2，杨致邦1,3，徐 进1,2，甘胜伟1,2，邱国平1,2，孙善全1,2?（400016 重庆，重庆医科大学基础医学院：神经科学研究中心1 ，人体解剖学教研室2，病原微生物与免疫学实验室3） [摘要] 目的 观察在幼年大鼠脑膜炎脑水肿模型中水通道蛋白4（AQP4）的表达变化及内化现象，探讨AQP4及其内化在脑膜炎脑水肿发生中的作用。方法 采用幼鼠延髓小脑池注入B族溶血性链球菌建立细菌性脑膜炎模型，采用干湿质量法、伊文思蓝含量测定法、免疫印迹法分别检测脑膜炎幼年大鼠脑含水量、血脑屏障通透性以及AQP4的表达水平，运用免疫荧光双标的方法检测AQP4分别与早期内涵体标记物EEA1和晚期内涵体标记物MPR的共表达。结果 ① 脑含水量：模型组为（77.3±1.6）%，对照组为（81.4±2.3）%，模型组较对照组增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）；② AQP4表达水平：模型组为（44.50±7.45）%，对照组为（57.41±7.00）%，模型组较对照组增高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；③ 依文思蓝含量：模型组为4.35±0.21μg/g，对照组为4.27±0.33μg/g，无统计学差异（P＞0.05）；④ 脑膜炎模型中，AQP4分别与EEA1和MPR共表达。结论 在幼年大鼠脑膜炎脑水肿模型中，脑内AQP4表达上调，同时存在AQP4内化的现象。 [关键词] 脑膜炎；脑水肿；水通道蛋白-4；内化；内涵体 [中图法分类号］R741.02 ［文献标识码］A [基金项目]国家自然科学基金；重庆市自然科学基金（CSTC 2012jjA10022, CSTC 2011jjA10003） [通信作者]孙善全，E-mail:sunsq2151@cqmu.edu.cn Upregulation and Internalization of AQP4 in infancy rat brains with bacterial meningitis Huang Juan1,2， Lu Weitian1,2，Yang Zhibang1,3， Xu Jin1,2， Gan Shengwei1,2， Qiu Guoping1,2， Sun Shanquan1,2? ( 1Center of Neuroscience，2Department of Anatomy，3Pathogenic microorganism and Immunology Laboratory，College of Basic Medical Sciences，Chongqing Medical University，Chongqing，400016，China) [Abstract] Objective To examine the alteration of AQP4 expression and investigate the occurrence of aquaporin-4（AQP4）internalization in rat brains with bacterial meningitis, so as to explore the possible role of AQP4 and its internalization in the brain edema of meningitis. Methods Group B hemolytic Streptococcus was injected into the cerebellar medulla pool of rat brains to establish bacterial meningitis model. The brain water content, integrity of blood-brain barrier and expression of AQP4 were measured, respectively, by wet and dry weight methods, Evans blue(EB) staining and western blot. Double immunofluorescence labeling was applied to detect the co-expression of AQP4 with EEA1 and AQP4 with MPR, respectively. Results ① Compared with control group [（77.3±1.6）% ], the brain water content in the mo