科-学-技-术-成-果-鉴-定-证-书范本.docVIP

成果 登记 登 记 号 批准日期 科 学 技 术 成 果 鉴 定 证 书 冀科成转鉴字[2012] 第3－021号 成 果 名 称：EB病毒感染、基因转染致上皮细胞恶性转化及其潜伏膜蛋白的功能 完 成 单 位：河北联合大学 中国疾病预防控制中心病毒病所 （盖章） 鉴 定 形 式：会议鉴定 组织鉴定单位：河北省科技成果转化服务中心（盖章） 鉴 定 日 期 ： 二○一一年十二 鉴定批准日期 ： 二○一一年十二 国家科学技术委员会 一九九四年制 简 要 技 术 说 明 及 主 要 技 术 性 能 指 标 任务来源：本课题是2008年河北省厅计划项目，课题编号：Z2008316。 所属科学技术领域（填写到三级学科填写完成删除提示）：传染病预防 主要技术内容：利用EB病毒感染及癌基因BARF1转染人胃上皮细胞GES-1，通过Scid鼠成瘤实验，分析了EB病毒感染及癌基因BARF1表达在人胃上皮细胞恶性转化中的作用；通过不同人群EBV感染及其产生抗体效价的检测，分析了EBV感染与临床病理特征的相关性，探讨了EBV致癌可能的机制。同时，观察了EBV-LMP蛋白在树突状细胞、Balb/C小鼠及猴子体内免疫的效果。 主要研究结果 1.通过EBV感染及BARF1基因转染人胃上皮细胞，获得了携带EBV的人胃上皮细胞株GES-1/EBV及稳定表达BARF1基因的细胞株GES-1/BARF1，发现了EBV感染及BARF1基因转染均可使人胃上皮细胞形态与行为发生改变。 2.将携带BARF1基因的细胞株及其TPA刺激组细胞分别接种至Scid小鼠，观察肿瘤形成情况。发现了表达BARF1基因的细胞单独接种至Scid小鼠不能形成肿瘤，但表达BARF1基因的细胞用TPA刺激后，接种至Scid鼠能形成肿瘤；阐明了肿瘤的形成不仅需要癌基因的作用，还需环境中促癌物较长时间的诱导；完善了EBV感染导致胃癌发生可能机制的理论。 3.通过检测北京地区0～14岁儿童EBV感染血清学调查、EBV感染重症疾病患儿血浆中游离EBV 病毒载量及抗体效价、胃癌患者中EBV感染状况分析，发现了EBV感染的病毒载量及其产生的抗体效价可作为EBV相关疾病早期诊断的参考依据。4.使用EBV潜伏膜蛋白（EBV-LMP）免疫树突状细胞、Balb/C小鼠及猴子，观察EBV-LMP蛋白产生的免疫应答水平，发现了EBV-LMP蛋白可产生EBV-LMP特异性细胞和体液免疫反应，证实了EBV-LMP蛋白具有抗肿瘤的作用。 与当前国内外同类技术主要参数、效益、市场竞争力的比较 国内外对EBV与胃癌关系的研究较多采用组织病理学方法，虽然能够说明EBV感染与胃癌临床病理特征的相关性，但EBV相关胃癌发生、发展分子机制尚未明确，并且目前还没有EBV相关肿瘤有效的预防、早期诊断及治疗措施。 本课题利用EB病毒感染及癌基因BARF1转染人胃上皮细胞，在基因水平研究EBV的致癌机制；通过不同人群EBV感染的病毒载量及其产生抗体效价的检测，评价EBV相关疾病的严重程度，分析EBV感染与临床病理特征的相关性；证实了EBV感染及其编码癌基因BARF1可促进人胃上皮细胞的恶性转化；发现了肿瘤的发生不但要有癌基因的存在，还需促癌物刺激，阐明了肿瘤的发生是多基因多步骤的复杂过程；完善了EBV感染导致胃癌发生可能机制的理论。建立了以早期抗原的抗体，衣壳抗原的抗体为靶点的EBV相关疾病的筛查及研究平台，推动了EBV相关领域分子生物学，病毒学及肿瘤学的发展。同时，通过观察EBV-LMP蛋白在树突状细胞、Balb/C小鼠及猴子体内免疫效果，证实了该蛋白在体内能够诱导产生EBV-LMP特异性CTL，具有抗肿瘤的功能，为EBV相关肿瘤的预防及治疗提供了科学的依据。 成果创造性、先进性 1、建立了携带EBV的人胃上皮细胞株GES-1/EBV及稳定表达BARF1基因的细胞株GES-1/BARF1； 2、阐明了癌基因BARF1在细胞恶性转化过程中起重要作用,人体肿瘤的形成不仅需要癌基因的作用，还需促癌物较长时间的诱导； 3、研究发现外周血中EBV游离DNA拷贝数及其抗体效价的检测对评价EBV相关疾病的严重程度有一定参考价值，EBV感染与临床病理特征密切相关； 4、研究证实EBV-LMP蛋白能够诱导产生LMP特异性CTL，该蛋白具有抗肿瘤作用。 作用意义（填写完成删除提示直接经济效益和社会意义）：利用EBV感染及癌基因BARF1转染人胃上皮细胞GES-1作为研究对象，在基因水平研究EBV的致癌机制，发现了肿瘤的发生不但要有癌基因的存在，还需促癌物刺激，阐明了肿瘤的发生是多基因多步骤的复杂过程；完善了EBV感染导致胃癌发生可能机制的理论。建立了以EBV早期抗原的抗体，衣壳抗原的抗体为靶点的EBV相关疾病的早期筛查及研究平台，推动了EBV相关领域分子