第十六章 抗生素类药物分析.pptVIP

第一节 概述 第二节 β-内酰胺类抗生素 青霉素 氨苄西林（氨苄青霉素） 阿莫西林（羟氨苄青霉素） 头孢羟氨苄 （二）手性C （三）共轭体系 （四）β–内酰胺环的不稳定性 3）异构体：  相对保留时间 1--被测物  2--标准物 异构体 相对保留时间 判断 B异构体 0.85 供试液谱图中A异构体的峰面积 A异构体 1.0 与A、B异构体峰面积和之比应 为0.48~0.55。 链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 　庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3 [B型题] 巴龙霉素 D-葡萄糖胺+脱氧链霉胺+D-核糖+巴龙霉糖 巴龙胺 苷元 巴龙二糖胺 糖 庆大霉素 糖 苷元 绛红糖胺 + 脱氧链霉胺 + 加洛糖胺 糖 绛红糖胺 紫素胺 2-脱氧链霉胺 加洛糖胺 N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺 一、 结构与性质 多与硫酸成盐 链霉素 3个 庆大霉素 5个 碱性中心 碱性 （一） 水溶性 溶解性 （二） 链霉素 pH5～7.5 庆大霉素 pH2～12 稳定 稳定性 （四） UV （三） 坂口反应 N-甲基葡萄 糖胺反应 麦芽酚反应 二、 鉴别 茚三酮反应 （一） △ 羟基胺结构 （2）Molisch反应 具有五碳糖或六碳糖的氨基糖苷类抗生素经酸水解后，在盐酸作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，加入α –萘酚（红紫色）或蒽酮（蓝紫色） 红紫色 （3）Elson-Morgan反应 水解产生的N-甲基-L-葡萄糖胺在碱性溶液中与乙酰丙酮合成吡咯衍生物，再与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反应，生成樱桃红色缩合物。 蓝紫色 （4）麦芽酚反应－链霉素的特征反应 链霉素水解得到的链霉糖经分子重排使环扩大形成六元环，然后消除N-甲基葡萄糖胺，再消除链霉胍，生成α-甲基-β-羟基-γ-吡喃酮（麦芽酚），该化合物与Fe3+在弱酸性溶液中形成红紫色配位化合物。 紫红 麦芽酚 （5）坂口反应－链霉胍的特有反应 向链霉素的水解产物链霉胍与NaBrO2反应得产物1；8-羟基喹啉也和NaBrO2反应得产物2。产物1和产物2再相互作用生成橙红色化合物。 （八）色谱法 （1）TLC法：硫酸庆大霉素的鉴别 点样：供试液：展开、凉干、碘蒸气中显色 对照液 判断：供试液与对照液所显斑点的颜色与位 置应一致。 点样：供试液 对照液①：硫酸链霉素标准品 对照液②：硫酸链霉素标准品 + 硫酸 新霉素标准品+ 硫酸卡那霉素标准品 判定法：供试液中主斑点的位置、颜色、大小 应与对照液① 相同， 对照液②应显示分离清晰的3个斑点 否则试验无效。（2）HPLC法：硫酸庆大霉素的鉴别 比较供试液与对照液各组分的保留时间。 特殊杂质的检查 （1）链霉素中链霉素B的检查－TLC法 硅胶G板（使用前需活化）、展开剂 甲苯-冰乙酸-甲醇（50: 25: 25）、0.2％二羟萘的乙醇－20％硫酸混合液 （2）庆大霉素中组分C的检查－衍生化后HPLC 色谱柱、流动相、检测波长、衍生化条件的摸索 组分C的毒副作用和耐药性与庆大霉素有差异，导致产品的效价和临床疗效 + + 4 10 . pH 吲哚衍生物 巯基醋酸 邻苯二醛 氨基 λmax = 330nm 衍生化原理 1. 1-烷基硫代-2-烷基 异吲哚衍生物 RP－HPLC 方法 2. 规定 C1 25~50% C1a 15~40% C2a +