实验7-2-丙二醛含量测定.docVIP

实验7-2 丙二醛（MDA）含量测定 【实验目的】 1、掌握植物组织中丙二醛含量测定的原理和方法。 2、了解丙二醛含量测定的意义。 【实验原理】 植物器官在衰老或逆境胁迫时，会发生脂质过氧化作用，丙二醛（MDA）是其终产物之一，其含量可以反映脂类过氧化程度和植物遭受逆境伤害的程度。 在高温和酸性条件下，丙二醛与硫代巴比妥酸（TBA）反应，生成红棕色的3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二酮（三甲川），在532nm处有最大吸收波长。植物在胁迫条件下可溶性糖增加，而糖与硫代巴比妥酸的反应产物在532nm也有吸收（最大吸收波长为450nm），因此测定植物组织中丙二醛含量时需排除可溶性糖的干扰。 采用双组分分光光度法可分别求出丙二醛和可溶性糖的含量。蔗糖与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为85.40和7.40；丙二醛与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为0和155000，根据Lambert-Beer定律，列出二元一次方程： A450=C1×85.4 A532- A600=C1×7.4+ C2×155000 解此方程得： C1（mmol/L）=11.71 A C2（μmol/L）=6.45（A532- A600）-0.56 A450 其中：C1——可溶性糖的浓度 C2——丙二醛的浓度 A450、 A532、A600分别表示45