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实验 血液一般检查 上海交通大学医学院 丁磊 【目的】 掌握血涂片的制备和瑞氏染色的方法。 掌握外周血各类细胞的形态特点。 【器材】 一次性消毒采血针、75%乙醇棉球、载玻片、推片、吸耳球、显微镜。 【试剂】 瑞氏染液 I液：包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇（AR级以上）600.0ml、甘油15ml。 II液：磷酸盐缓冲液（pH6.4~6.8） 【标本】 EDTA 抗凝静脉血或外周血。 【操作】 （1）采血：静脉采血后，使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端 1cm处加1滴抗凝血，如果使用手指采血则直接用洁净玻片蘸 1 滴血。 （2）推片：左手平执载玻片，或放在类似桌子等平坦地方，右手持推片从后方或前方接近血滴，使血液沿推片边缘展开成适当的宽度，立即将推片与载玻片呈 30~45。 角，轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片，血涂片应呈舌状，头、体、尾清晰可见。 （3）干燥：将推好的血涂片在空气中晃动，使其迅速干燥。天气寒冷或潮湿时，应于 37 ℃温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。 （4）标记：在载玻片的一端用记号笔编号。 （5）染色：待血涂片干透后，用蜡笔在两端划线，以防染色时染液外溢。然后将玻片平置于染色架上，滴加染液（I液） 3~5 滴，使其迅速盖满血涂片，约0.5~ 1min后，滴加等量或稍多的缓冲液（II 液），轻轻摇动玻片或用吸球对准血片吹气，使染液充分混合。 （6）冲洗：5~10 min后用流水冲去染液，待干。 （7）结果观察：将干燥后的血片置显微镜下观察。用低倍镜观察血涂片体、尾交界处血细胞平铺的部分。 细胞 大小 中性粒细胞 10~15um 嗜酸性粒细胞 13~15um 嗜碱性粒细胞 10~12um 单核细胞 15~25um 淋巴细胞 6~15um 中性杆状核粒细胞 中性分叶核粒细胞 单核细胞 小淋巴细胞 大淋巴细胞 大淋巴细胞 嗜碱性粒细胞 Eosinophil 嗜酸性粒细胞 drumstick 假性drumstick 【结果报告】 细胞 计数 百分比% 中性粒细胞 正正 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 描绘镜下所见外周血细胞形态 实验(血涂片制备和染色）流程图 * * SMEAR Drop of blood Slide 1 Slide 2 On contact, slide 2 extends the drop along its 1” side Slide 2 Pushing angled slide 2 along #1 smears the line of blood across slide 1 Slide 2 Lift away slide 2; dry #1; stain; coverslip Smear A few cells are damaged; smear is not evenly thick; staining is uneven. Same apply to SPREADS * * * * * *
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