试验十肝中酮体生成作用.DOCVIP

实验十二 肝中酮体生成作用 【目的】 1．了解肝中酮体生成实验的原理和方法。 2. 验证酮体生成事肝脏特有的功能。 【原理】 用丁酸作为底物，将丁酸溶液分别与肝匀浆和肌匀浆保温。肝细胞中含有酮体生成酶系，故能生成酮体，酮体中的乙酰乙酸与丙酮可与显色粉中的亚硝基铁氰化钠作用，生成紫红色化合物。肌肉中没有生成酮体的酶系，同样处理的肌匀浆则不产生酮体，因此不能与显色粉产生颜色反应。 【器材】 小白鼠、匀浆机或研钵、恒温水浴箱、离心机、剪刀、白瓷反应板、试管、滴管、试管架。 【试剂】 1.0.9%氯化钠溶液。 2.洛克溶液 取氯化钠0.9g、氯化钾0.042g、氯化钙0.024g、碳酸氢钠0.02g、葡萄糖0.1g放入烧杯中，加蒸馏水溶解后，加水至100ml,置冰箱中保存备用。 3. 0.5mol/L丁酸溶液 取44.0g丁酸溶于0.1mol/LNaOH溶液中，加0.1mol/LNaOH溶液至1 000ml。 4.0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.6） 准确称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·2H2O）7.74g和磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）0.897g，用蒸馏水稀释至500ml，准确测定pH值。 5.15%三氯醋酸溶液。 6.显色粉 亚硝基铁氰化钠1g，无水碳酸钠30g,硫酸铵50g,混合后研碎。 7.家兔（或小鼠） 【操作】 1．肝匀浆和肌匀浆的制备 取小鼠一