基因工程的操作过程培训课件.ppt

一、 DNA的体外重组（切与接） 二、 重组DNA分子的转化和扩增（转与增） 三、 转化子的筛选和鉴定（检） 三、 转化子的筛选和鉴定（检） 第十三章 基因工程的操作过程 （一）载体遗传标记检测 （二）克隆DNA序列检测 （三）外源基因产物检测 第十三章 基因工程的操作过程 由于重组率和转化率不可能达到理想极限，因此必须借助各种筛选和鉴定方法区分转化子与非转化子、重组子与非重组子、目的重组子与非目的重组子 转化子 重组子 目的重组子 （一） 载体遗传标记检测 1、抗药性筛选法 ROP ROI Sal I BamH I Tc r Pvu I Pst I Pst I EcoR I Cla I Hind III Hind II Bal I Ap r （1）抗药性筛选法的基本原理： pBR322 4363 bp ori 抗药性筛选法可区分转化子与非转化子、重组子与非重组子 将外源DNA片段插在EcoRI位点： 非重组子呈 Apr、Tcr 重组子呈 Apr、Tcr 将外源DNA片段插在BamHI位点： 非重组子呈 Apr、Tcr 重组子呈 Apr、Tcs （2）抗药性筛选法的基本操作： 先将转化液涂布含有Ap的平板 再