血红蛋白分析、流产物染色体非整倍体病检测.pptVIP

荧光原位杂交技术分析 方法：杂交、观察 优点：无需培养、标本要求低、较直观 缺点：成本高、费时、需要荧光显微镜，一般只能查出常见染色体数目异常等。 染色体片段分析 多重连接探针扩增multiplex ligation dependent probe amplification，MLPA) 方法：DNA提取，PCR扩增，测序 优点：无需培养、标本要求低、较直观、快速、试剂成本低廉等。 缺点：需要测序仪等特殊仪器、不能查出探针以外的染色体片段等 微阵列比较基因组杂交技术（array-CGH） 原理：将待测样本DNA杂交到覆盖有标准人类全基因组核苷酸序列的微阵列上，经配套扫描仪扫描，计算机软件及生物信息学数据库分析样本全基因组DNA拷贝数改变。 优点：克服了传统方法的局限性，直接定位在基因水平上。 缺点：设备昂贵，收费高。 标本要求 流产胚胎（绒毛）：请在吸、刮绒毛后从吸管的无菌端取出并置于无菌纱布上，与蜕膜进行鉴别（无法确定绒毛组织的，12周内送检整个胚胎；12周以上的送检心脏血或肝脏），待确定为绒毛组织或胎芽后将标本浸泡于无菌生理盐水中。尽量新鲜，2~8℃保存，当天送检。 引产的异常胎儿：建议优先送检引产胎儿的心脏血（EDTA抗凝血3-4ml）。如无法获得胎儿血样本可切取黄豆大小的内脏组织（肝脏最佳），浸泡于无菌生理盐水中，2~8℃保存，当天送检。 无菌杯 采血试管 洁净的尿液管 染色体片段分析技术的流产标本采集 流产绒毛染色体检查可采用细胞培养+G带显示核型分析 但由于流产绒毛采集过程中容易污染，如遇标本污染中心将采用多重连接探针扩增技术（MLPA）方法对染色体进行分子检测，并出具报告，但不另外增加费用。 谢 谢 一、 血红蛋白分析应用意义 血红蛋白病 血红蛋白病（Hemoglobinopathy）为世界上最常见的一类单基因遗传病由于血红蛋白分子结构异常（异常血红蛋白病），或珠蛋白肽链合成速率异常（珠蛋白生成障碍性贫血，又称海洋性贫血）所引起的一组遗传性血液病。 临床可表现溶血性贫血、高铁血红蛋白血症或因血红蛋白氧亲和力增高或减低而引起组织缺氧或代偿性红细胞增多所致紫绀。 血红蛋白病 根据合成受阻的珠蛋白类型，可分为α-、β-、δ-、和δβ-地贫等。α-和β-地贫是最重要、最常见的地贫类型，少见的地中海贫血（γ-地贫、δ-地贫、(δβ)0-地贫） 异常血红蛋白病(可与地中海贫血相互作用) （HbQ、HbG、HbS、HbC、HbE） 胎儿血红蛋白持续存在综合症（HPFH) 血红蛋白分析技术 血红蛋白分析技术：采用HPLC等相应技术，分析受检个体的血红蛋白组份，如HbA2、HbF、 HbA及异常Hb等。 血红蛋白分析技术是进行地贫基因分析的基本前提。 血红蛋白分析的临床应用 HbA2、HbF及异常Hb等血液学表型指标是地中海贫血初步筛查指标，单独通过这些指标和/或结合全血细胞分析技术可以查出地贫初筛阳性个体。 血红蛋白分析的临床应用 HbA2升高（＞3.5%）：可疑的β-地贫 除极少数的临床表型为静止型的突变位点外，几乎所有的β-地贫携带者HbA2值均升高。部分疾病如疟疾、甲状腺功能亢进等也可引起HbA2值升高。 因此绝大多数β-地贫携带者HbA2值升高，HbA2值升高不全是β-地贫携带者。 血红蛋白分析的临床应用 HbA2降低（＜2.5%）：可疑的α-地贫 此外，缺铁性贫血、铅中毒、骨髓增生性疾病、铁幼粒细胞性贫血也可引起HbA2降低 HbA2正常（2.5%～ 3.5% ），同时MCV和/或MCH低：可疑α-地贫 静止型α-地贫：包括Hb组份等所有血液学指标可全部正常 血红蛋白分析的临床应用 HbF值升高，达40%以上，提示重型或中间型β-地贫 胎儿血红蛋白持续存在综合症（HPFH)： 不在常规基因检测范围，Hb分析可提示 (δβ)0-地贫： 不在常规基因检测范围，Hb分析可提示 地中海贫血基因（常规）检测范围 目前全世界至少发现200种β地贫基因突变类 型，在中国人中至少发现30种突变。 目前已发现十多种以上α地贫基因缺失型突变，在中国人中至少发现十种以上； α地贫基因点突变有约70种 ，中国南方发现12种。 地中海贫血基因（常规）检测β地贫基因点突变17种， 3种α地贫基因缺失型及3种α地贫基因点突变型；涵盖中国南方人群中95%以上的α-和β-地中海贫血致病基因缺陷。 地中海贫血基因（常规）检测的局限性 地中海贫血基因（PCR/RDB法）检测β珠蛋白基因突变类型有限： 目前全世界至少发现200种β珠蛋白基因突变类 型，在中国人中至少发现30种突变。国内临床应用的PCR/RDB检测试剂盒仅检测17种常见及少见突变。因PCR/RDB法不能检