生物化学第二章酶化学.ppt

* ZhangJG-Biochemistry * （2）有机砷、汞化合物 此类物质与巯基作用，抑制含巯基的酶。如对氯汞苯甲酸，可用过量巯基化合物如半胱氨酸或还原型谷胱甘肽解除。 砷化物可破坏硫辛酸辅酶，从而抑制丙酮酸氧化酶系统。路易斯毒气(CHCl=CHAsCl2)能抑制几乎所有的巯基酶。 砷化物的毒性不能用单巯基化合物解除，可用过量双巯基化合物解除，如二巯基丙醇等，是临床上重要的砷化物及重金属中毒的解毒剂。 * ZhangJG-Biochemistry * （3）氰化物 与含铁卟啉的酶（如细胞色素氧化酶）中的Fe2+结合，使酶失活而抑制细胞呼吸。 （4）重金属 银、铜、铅、汞等盐类能使大多数酶失活，可用螯合剂如EDTA解除。可能是与酶分子中的巯基发生反应，或置换酶中的金属离子。 （5）烷化剂 主要是含卤素的化合物，如碘乙酸、碘乙酰胺、卤乙酰苯等，是一种非专一性抑制剂，可以烷化巯基，使酶失活。常用于鉴定酶中巯基。 ? * ZhangJG-Biochemistry * 四、 温度对酶促反应速度的影响 最适温度及影响因素 温度对酶促反应速度的影响有两个方面： ①提高温度，加快反应速度； ②提高温度，酶变性失活。 ? 温度系数Q10：温度升高10℃，反应速度与原来的反应速度之比，大多数酶的Q10一般为1~2。 温血动物的酶，最适温度35℃—40℃， 植物酶最适温度40℃—50℃， 细菌Taq DNA聚合酶70℃。 * ZhangJG-Biochemistry * * ZhangJG-Biochemistry * * ZhangJG-Biochemistry * 最适温度是使酶促反应速度达到最大时的温度。 最适温度不是酶的特征常数，它与底物种类、作用时间、pH、离子强度 等因素有关。 酶的保存： 酶浓度高、有底物、抑制剂和保护剂会使稳定。 ①液体酶制剂可以利用上述因素，低温短暂保存。 ②冻干粉可在在低温冰箱中较长期保存。 * ZhangJG-Biochemistry * 五、 pH对酶促反应速度的影响 1. pH影响酶活力的因素 ①影响酶蛋白构象，过酸或过碱会使酶变性。 ②影响酶和底物分子解离状态，尤其是酶活性中心的解离状态，最终影响ES形成。 ③影响酶和底物分子中另外一些基团解离，这些基团的离子化状态影响酶的专一性及活性中心构象。 * ZhangJG-Biochemistry * 2．酶的最适pH和稳定性pH 最适pH：使酶促反应速度达到最大时介质的pH。? * ZhangJG-Biochemistry * 最适pH与底物种类、浓度及缓冲液成分有关。 虽然大部分酶的pH—酶活曲线是钟形，但也有半钟形甚至直线形。 * ZhangJG-Biochemistry * 六、 激活剂对酶促反应速度的影响 凡是能提高酶活性的物质，都称为激活剂。 1、无机离子 如Mg2+、K+、Mn2+、Co2+、Cl-等 2、简单有机化合物对酶的激活 3、蛋白质对酶原的激活 * ZhangJG-Biochemistry * 1、?? 无机离子的激活作用 （1）金属离子：K+ 、Na+、Mg2+ 、Zn2+、Fe 2+ 、Ca2+ （2）阴离子：cl-、Br -、PO43- （3）氢离子 不同的离子激活不同的酶。 不同离子之间有拮抗作用和可替代作用，如Na+与K+、Mg2+与Ca2+之间常常拮抗，但Mg2+与Zn2+常可替代。 激活剂的浓度要适中，过高往往有抑制作用，1~50mM * ZhangJG-Biochemistry * 2、简单有机分子的激活作用 ①还原剂（如Cys、还原型谷胱甘肽）能激活某些活性中心含有—SH的酶。 ②金属螯合剂（EDTA）能去除酶中重金属离子，解除抑制作用。 3、蛋白酶对酶原的激活 * ZhangJG-Biochemistry * 酶原激活 某些酶在细胞内合成或初分泌时没有活性，这些没有活性的酶的前身称为酶原(zymogen， proenzyme)。使酶原转变为有活性酶的作用称为酶原激活(zymogen activation)。 消化道分泌的蛋白酶往往以无活性的酶原形式分泌，到达目的地时才被激活。这样可以避免对消化腺的水解。 例如: 胰蛋白酶的激活： 在肠道中被肠激酶和Ca2+ 激活，使无催化活性胰蛋白酶原转变为有活性的胰蛋白酶。 * ZhangJG-Biochemistry * * ZhangJG-Biochemistry * 血液中的凝血和纤溶系统的酶类原先亦都是以酶原形式存在的，只要有少数凝血因子被激活，即可引起级联反应的放大作用，快速形成有效的血液凝固。 * ZhangJG-Biochemistry * 七、 酶浓度对酶反应速度的影响 如果底物浓度足够大，[S] ＞＞[E]，