实验五 流式细胞术(Flow Cytometry)的原理及应用.pptx

DEPARTMENT OF IMMUNOLOGY实验五 流式细胞术(Flow Cytometry)的原理及应用细胞染色（流式细胞术）?1.收集细胞：取细胞总数约1×～ 5× 脾脏细胞 至于1.5mlEp管中（在管盖上标记好组别），5000rpm，4℃，5min（离心机需预先降温）2.染色：小心用枪去除上清，再加入50ul预混抗体的PBS（由助教准备），将细胞吹打混匀，避光， 4℃或冰上，染色15-20min3.清洗：加500ul的PBS，吹打混匀后，5000rpm，4℃，5min4.检测：小心用枪去除上清，再加入500ul PBS，吹打混匀，至于冰上，待流式仪检测流式细胞术调整仪器设置收集数据分析结果课堂目标了解流式细胞仪的构造、原理及应用，掌握“门”，“补偿”两个基本概念。学会简单分析流式数据：小鼠脾脏分离的单个核细胞中CD3+、CD4+ 、CD8+细胞的比例。Content流式细胞仪的简介流式细胞仪的组成及原理流式细胞术的应用流式细胞术实验操作流程及数据分析什么是流式细胞术？ 流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种快速、准确、客观的同时检测直线流动状态中单个细胞多项物理及生物学特性，加以分析定量的技术。检测速度快，分析样本量大在极短时间内可分析大量细胞，这是流式不同于其他细胞分析仪器的主要特点，可以每秒钟上万个细胞的速率进行测量。可检测的样本种类多样各种