第8章酶免疫技术教学课件.ppt

底物显色 定性或定量的分析 包被 反应 加入待测抗体或 抗原和酶标抗原 或抗体 洗涤 使结合在固相上 的抗原抗体复合物 与未结合的分离 1 2 3 4 一、基本原理 二、方法类型及反应原理 三个必要试剂 固相的抗原或抗体 酶标记的抗原或抗体（酶结合物） 酶反应的底物 夹心法 间接法 竞争法 捕获法 双抗体夹心法 双抗原夹心法 方法 ELISA检测抗原的方法 1、双抗体夹心法 测抗原最常用的方法 只适用于：二价及二价以上的大分子抗原 双抗体夹心法测抗原 + - E E E E E E E E E E E E E E E E E ELISA结果： 阳性 阴性 空白 注意标本中类风湿因子的干扰 2、双位点一步法 选择针对抗原分子上两个不同且空间距离较远的抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体 钩状效应（hook effect）：双位点一步法中，当标本中的待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别与酶标抗体和固相抗体结合而抑制夹心复合物的形成，显色降低，使最终测定结果低于实际含量，严重时可出现假阴性结果。 3、竞争法测抗原 + - E E E E E E E 2、加待检物抗原与酶标抗原竞争与抗体结合 3、加酶作用的底物不显色或显色弱 3、加酶作用 的底物显色 1、已知抗体包 被于载体表面 1、已知抗体包 被于载体表面 2、加待测物 和酶标抗原， 酶标抗原与抗 体结合 E 测小分