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- 2019-07-13 发布于上海
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液相色谱实验
实验目的:
学习掌握仪器原理、结构、应用及仪器使用注意事项。掌握色谱工作站的使用,独立操作,建立分析方法,了解色谱条件优化方法,建立单点标准曲线,分析待测样品浓度。
基本原理:
色谱仪是用来分析分离混合物的仪器,它是利用混合物各组分在固定相和流动相上的分配系数不同,对物质的组分进行分离,定性定量分析。液相色谱主要用于高沸点、遇热易分解以及具有生物活性的组分的分析分离。
本次实验重点针对依利特液相色谱的紫外可变波长检测器、单泵、手动进样器及比较常用的化学键合固定相C18柱(反相柱)的原理、结构、应用及仪器使用注意事项进行基本操作训练,掌握用外标法单点定量的要点及注意事项,掌握色谱工作站的设置、数据采集、数据处理、打印数据谱图报告的方法。
化学键合固定相
化学键合相色谱法是由液液分配色谱法发展而来。分配色谱法虽然分离效果好,但由于固定液的流失,会使柱效和分离选择性下降。
流失的固定相会使基线的噪声增加,降低了检测器的灵敏度。
化学键合相色谱法已逐渐取代液液分配色谱法,广泛应用,在高效液相色谱法中占有极其重要的地位。
根据键合固定相与流动相的相对极性的强弱,可分为正相键合相色谱和反相键合相色谱。
反相键合相色谱的键合固定相极性小于流动相的极性,适合分离非极性、极性和离子型化合物。应用范围比正相键合相色谱更为广泛,约70%-80%的分析任务皆由反相键合相色谱法完成。
非极性烷
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