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免疫检测中的干扰
选译自《The Immunoassay Handbook (Fourth Edition)》
翻译:武汉原谷生物科技有限责任公司
免疫检测试验是现代临床实验室中一种重要的高敏检测技术, 但它们的致命弱点是它
们易受干扰。在病人的样本中存在干扰物质会导致错误的测试结果, 无论是假阳性或假阴性。
这个测试错误可能在临床上很重要, 并会导致对病人的误诊和灾难性后果。对免疫检测试验
中的干扰问题早已有大量综述性文章(Boscato et al., 1989; Boscato and Stuart, 1986,
1988; Braunstein, 2002; Diamandis, 2004; Ismail and Barth, 2001; Ismail et al., 2002b;
Itoh and Yamaguchi, 1995; Jones, 2002; Kohse and Wisser, 1990; Kricka, 1999, 2000;
Kricka et al., 1990; Kroll and Elin, 1994; Levinson, 1992; Tate and Ward, 2004; Van
Kroonenburgh and Pauwels, 1988; Weber et al., 1990)。在这里, 我们概述了免疫检测
分析中干扰的范围, 消除因其存在于生物体液中的分析问题的方法, 和临床重要的例子。免
疫分析干扰是一个长期存在的问题, 可追溯到1900s 早期的血清学测试(Page and Heimoff,
1946; Seelman, 1918)。正如一位作者在书信中所述, Wassermann 检测梅毒 (Seelman,
1918):
在死亡和税收之外, 只有一件事我比这两者更确信的是,如果通过所描述的方法对我
的血液进行测试,得到了一个阳性结果,我不会接受这是最终的诊断结果, 而是继续用另一
种更准确和更可靠的方法进行测试。”
在现代, 在二十世纪七十年代早期的报告中描述了在用免疫检测方法分析乙肝表面抗
原的试验中出现循环抗体导致的假阳性结果(Hollinger, 1972; Prince et al., 1973)。该
文章发表近40 年后, 免疫分析的干扰仍然是一个问题, 但对抗措施已经变得更加成熟, 实
验人员和普通大众对此的意识已显着增加。许多类型的干扰因素是复杂的, 不同方法,不同
测试,不同病人都可能导致不同的效应,而所有这些因素导致这个关键问题难以解决。
免疫检测干扰的范围
下表总结了免疫检测中干扰的主要来源。
抗待检物抗体 抗动物抗体(鼠兔牛羊等) 自身抗体
血液替代品 残留物 收集管
污染物 造影剂 补体
药物 药物代谢物 交叉反应
纤维蛋白 溶血 草本之疗
异嗜性抗体 高剂量钩状效应 人抗动物抗体
成像试剂 免疫复合物 样品量不足
脂血症 微凝块 病变蛋白
RF 样品储存 样品基质
表1:免疫检测中的干扰源
干扰可能来源于实验的预分析和分析阶段,下面各部分将对这些进行简要描述。
循环抗体
抗动物抗体
抗动物抗体可能在双抗夹心法中导致假阳性或少数情况下的假阴性干扰。抗动物抗体桥
连动物源捕获抗体和检测抗体就会导致假阳性结果, 如图1B 所示,检测结果无法将这种情
况与特定抗原桥连捕获抗体与检测抗体的结果区分开来。假阴性干扰被认为是由于抗动物抗
体分别结合到捕获抗体或检测抗体上, 使待测物无法桥连捕获抗体和检测抗体 (三明治的
形成被抑制
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