微生物营养及培养基.pptVIP

第四章 微生物营养与培养基 （一）四个原则 1、目的明确（根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基）培养什么微生物、获得什么产物、用途 二、选择和配制培养基的原则和方法 2、营养协调营养协调(注意营养物的浓度和配比，特别是碳氮比C/N比) C/N比: 微生物培养基中所含的碳源中的碳原子与氮源中氮原子的摩尔数之比。不是简单的某碳源的重量与氮源的重量之比。因为，不同种类的碳源和氮源，其中含碳量和含氮量差别很大。 一般培养基的C/N比为100/0.5～2 。 以含氮量来看： NH3(82%)CO(NH2)2(46%)NH4NO3(35%)(NH4)2CO3(29.2%)(NH4)2SO4(21%) 适宜营养物质的选择 表3微生物常见的有机碳源 利用会导致pH上升 乙酸，乳酸，柠檬酸等 有机酸 溶解性不好，液体培养对搅拌要求高。 CH4，C2H6，C4H10，C12~C20烷烃 烃类 甲醇被用来培养酵母。 甲醇，甘油 醇类 热值高，液体培养时消耗氧气多。在工业上常常少量添加作为消泡剂使用。 棉籽油，玉米油，豆油，葵花籽油等。 油脂 主要培养酵母用，工业上用麦芽汁发酵，制作啤酒。 发芽的大麦 麦芽 是非常好的碳源，成分复杂，在发酵工业中常用酵母发酵、抗生素和丙酮丁醇生产常用它为碳源。一般包括蔗糖35%，葡萄糖9%，果糖7%，8种其它糖类4%，其它还原物质3%，24种氨基酸占4.5%，有机酸5%，蜡质、甾醇和磷脂占0.4%，灰分12%，水20%。 甜菜糖蜜，甘蔗糖蜜 糖蜜 迟效碳源。纤维素只有少数微生物能够作为碳源。 淀粉，玉米粉，纤维素 多糖 用作速效碳源，但会加速菌体呼吸，溶氧下降中间代谢物积累 蔗糖 二糖 用作速效碳源，但会加速菌体呼吸，溶氧下降中间代谢物积累 葡萄糖，麦芽糖，果糖，麦芽糖，半乳糖，木糖 单糖 说明 举例 种类 表 不同能源培养细胞的得率 0.36 0.34 0.68 0.40 1.03 0.62 0.51 细胞得率 （g细胞/g基质） 顺丁烯二酸盐 醋酸盐 乙醇 甲醇 正烷烃 甲烷 葡萄糖（糖蜜） 碳源基质 表 常见微生物氮源 生物固氮是地球上仅次于光合作用的第二个重要的生物化学反应。 少数细菌（约50多个属，100多种） N2 硝酸盐要还原后才能用，可以同时调节pH。 部分微生物（氨基酸异养型不能利用） 无机氮源：铵盐、硝酸盐、氨水等 含有丰富的氨基酸，是微生物的优良氮源。 大部分微生物，如青霉，酵母，大肠杆菌。 有机氮源：牛肉浸膏、酵母浸膏、花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、麦麸、尿素等 特点 可以利用的微生物 种类 表 常用的培养基中的无机盐及参考浓度（g/L） 氧化硫酸杆菌培养液 0.01 Mo （NH4）6Mo7O24﹒4H2O 氧化硫酸杆菌培养液 0.05 Mn MnCl2﹒4H2O 蓝细菌培养基 0.1 Na NaHCO3 氧化硫酸杆菌培养液 0.25 Ca CaCl2﹒2H2O 察氏培养基 0.01 Fe FeSO4 氧化硫酸杆菌培养液 0.22 Zn ZnSO4﹒7H2O 氧化硫酸杆菌培养液 0.016 Cu CuSO4﹒5H2O 牛肉膏蛋白胨培养基 5 Na NaCl 察氏培养基 0.5 K KCl 克氏培养基 0.12/1.0 K，P KH2PO4/K2HPO4 察氏培养基 0.5 Mg MgSO4 培养基名称 参考浓度 提供的元素 无机盐 pH 渗透压和水活度 氧化还原电位 3、物理化学条件适宜: 　细菌: pH7.0~8.0 　放线菌：pH7.0 ~8.5 　酵母菌: pH3.8~6.0 　霉菌： pH4.0~6.0 pH：微生物有最佳生长pH 微生物在生长过程中培养基pH值可能发生的变化 ： 在含糖基质上生长,会产酸而使pH下降， 在分解蛋白质和氨基酸时, 会产NH3而使pH上升， 以 (NH4)2SO4 作N 源 , 会过剩 SO4 2-, 而使pH下降， 分解利用阳离子化合物如：NaNO3, 会过剩 Na+ 而使 pH 上升。 维持培养基pH的方法 使用磷酸缓冲剂： K2HPO4 /Na2HPO4 , H2PO4/NaH2PO4 采用“备用碱” ：CaCO3 、CaHCO3 采用弱酸盐：柠檬酸盐、乳酸盐等 采用液氨或盐酸 渗透压(osmotic pressure): 高浓度溶液向低浓度溶液渗透时，其溶质分子所产生的压力。 高渗溶液会导致微生物细胞发生质壁分离 低渗溶液会导致微生物细胞吸水膨胀甚至破裂 水的可利用性 用水活度(wat