微生物学标本的采集.doc

微生物学标本的采集 标本的正确采集是实验室质量保障的前提条件。如何正确采集或指导患者采集标本已是临床工作重点之一。 血液和骨髓的采集： 在病人寒战、发热初期或上升期、抗生素使用之前经严格消毒后成人采集肘静脉血约20ml，同时注入厌氧和需氧培养瓶内，先注入厌氧后注入需氧。每瓶注入8～10ml，但不要超过10ml；小儿使用小儿瓶采血2～5ml。因为菌血症病人每1～3ml血中才可能存在1个细菌，多个研究显示每多抽1ml血，阳性率可提高0.6%～4.1%,平均为3.2%，故增加采血量可以提高标本阳性率，但并不是血越多越好，血太多就不易稀释血液中原有的抗生素、补体、抗体和溶菌酶等抗菌物质，同时培养液也被稀释，不利于细菌生长。同时需氧和厌氧培养同时送检，也能提高细菌的检出率，特别是厌氧菌的检出率。对已用抗生素者应在下次用药之前采血。骨髓中含有大量单核巨噬细胞，故疑为骨髓炎或伤寒病人可采集骨髓1ml作需氧培养。 采血时应注意的问题？注意消毒和无菌操作。 采血时的皮肤消毒推荐采用三步消毒法： 1． 首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。 2． 然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤（1%～2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒），从穿刺点向外以1.5cm～2cm直径画圈进行消毒。 3． 最后用70%酒精脱碘。 严格执行三步消毒后，可行静脉穿刺采血。注意对碘过敏的患者，只能用70%酒精消毒，消毒60秒钟，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 血培养检测 培养瓶消毒程序： 1． 用70%酒精或碘溶液(不要使用碘)消毒血培养瓶橡皮塞子。 2． 酒精作用约60秒。 3． 在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。 如采用真空采血针时应注意采血量(血培养采集与其他采血管不相同，如果等负压消失再停止采血，每瓶可采血约30ml，会大大降低培养阳性率)。 采血的时机？一般情况下，对间歇性菌血症，发热初期或发热上升期时采集血液标本，对持续性菌血症可不考虑采血时间，如果怀疑为亚急性心内膜炎，应在2小时内采集三次血培养标本。24小时内应采集三次血标本（可大大提高阳性率），然后等血培养结果出来后再决定是否再采集下一组血标本。不推荐每天采集一次血标本（因为和只采一次血培养标本的阳性率相当，不能提高阳性率）。 采血的方法？一般在肘静脉采集标本，有条件时可从左右肘静脉同时采集标本，如果两侧检出的细菌为同一种细菌，可以肯定为病原菌，若不一致，可能在采血时有污染。 血培养阳性率为什么不高？原因1.不明原因发热菌血症和败血症只占一小部份,国外血培养的阳性率只有5～10%, 但国外血培养送检量高,阳性绝对数大大多于国内; 2.采血时机和采血量不足造成血培养阳性率降低; 3. 采血量过多也会影响血培养检出率，血量过多，可稀释培养液，并且血中过多的抑菌物质（抗生素、抗体等）也可抑制细菌的生长。同时血量过多，血液中的红细胞易造成假阳性的发生； 4.血培养瓶存放不当,将血培养瓶放入冰箱中,采血时直接取出就用,一些苛养菌易被冻死; 5.采血时消毒不严格,采血后未及时混匀等都会影响血培养的阳性率。 一次血培养阴性能排除菌血症吗？不能，因为采血时机、采血量、抗生素使用等因素可以影响细菌的检出量，故一次培养阴性不能完全排除菌血症。应在24小时内采集三次标本，以提高阳性率。 2. 痰标本的采集： 要求采集肺深部的痰液，不要唾液。一般采用自然咳痰法，但以气管镜采集法标本质量最好。 ⑴ 自然咳痰法： 嘱病人清晨起床后，用清水嗽口后，用力自气管深部用力咳出当日第一口浓痰丢弃，然后等患者感觉有痰后用清水反复嗽口，用力自气管深部用力咳出浓痰于无菌容器中，立即送检（应注意观察痰液的性状，如果是白色或无色的水样，最好重留标本送检）。只要能确认是痰液，24小时内均可送检 ⑵ 气管镜采集法： 用气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得。 ⑶ 小儿取痰法： 用弯压舌板向后压舌，用无菌棉拭深入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部和气管分泌物，粘在棉拭上，将棉拭放入无菌管中立即送检。 呼吸道细菌的大致分布？口腔和鼻咽部分布着大量的正常菌群，如凝固酶阴性葡萄球菌、奈瑟氏菌、革兰阳性杆菌等。下呼吸道一般无细菌存在。只有在感染状态下才会有细菌生长。 标本采集不合格对实验结果的影响？1.标本为唾液，而非痰液，培养的结果是口腔正常菌群，导致假阴性的发生；2.痰液中混入大量的唾液，稀释了致病菌的量，导致对培养结果判断的困难性。3.口腔未嗽口，口腔正常菌群掩盖了致病菌；4.一般取清晨的第一口痰，因为第一口痰在肺部停留时间长,如果取第二口痰，痰量比较少，甚至没有痰。 痰标本质量实验室判断标准？ 每低倍视野下白细胞10个、上皮细胞25个，培养的结果临床价值不大，需再次送检；