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代谢调节与代谢工程 3.四碳二羧酸的来源 Δ在生产菌中检出CO2固定反应酶活性 磷酸烯醇丙酮酸(PEF)羧化酶和苹果酸酶 谷氨酸对糖的转化率达到81.7% Δ DCA循环 标志酶：异柠檬酸裂解酶 在谷氨酸发酵中，DCA环一方面可以作为TCA循环有缺陷时C4二羧酸的补充 在谷氨基酸生产菌的生长中提供能量 作用 谷氨酸生成期中要封闭DCA环？ 通过DCA环提供C4二羧酸时谷氨酸对糖的转化率仅为54.4% 代谢调节与代谢工程 4.异柠檬酸脱氢酶活力强 提供NADPH,用于还原α-酮戊二酸生成谷氨酸，形成氧化还原共扼体系 5.氨的导入 合成谷氨酸的反应有3种： α-酮戊二酸 + NH4+ NADPH + 谷氨酸 H2O NADP + + 谷氨酸脱氢酶 α-酮戊二酸 + 天冬氨酸或丙氨酸 谷氨酸转氨酶 谷氨酸 α-酮戊二酸 + α-酮戊二酸 + 谷氨酰胺 NADPH + 2谷氨酸 NADP + 谷氨酸合成酶 代谢调节与代谢工程 生产菌中 谷氨酸转氨酶活力低，转氨作用可以不考虑 谷氨酸合成酶由于不受高浓度谷氨酸抑制，其作用值得重视 谷氨酸脱氢酶是合成积累谷氨酸的主要酶 氨的导入时 生物素缺乏， NH4+影响糖代谢速度：提高糖代谢速度 高效合成谷氨酸 生物素充足时， NH4+不影响糖代谢速度 6.谷氨酸合成的调节机制 谷aa比天冬aa优先合成 谷aa脱氢酶 谷aa对其反馈抑制和反馈阻遏 柠檬