棉纤维次生壁增厚相关基因的cDNA克隆与分析-作物学报.pdf

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第 29 卷 第 6 期 作  物  学  报 Vol. 29 , No. 6 2003 年 11 月  860~866 页 ACTA AGRONOMICA SINICA pp. 860~866  Nov. , 2003 棉纤维次生壁增厚相关基因的 cDNA 克隆与分析 秦治翔 杨佑明  张春华 徐楚年 翟志席 ( 中国农业大学农学与生物技术学院,北京 100094) ( ) 摘 要  以陆地棉品种“徐州 142”植株开花后 14 、18 、24 、30 d 的棉纤维和胚珠离体培养 12 d 、并分别在添加 0 对照 和 - 1 μ 100 mol ·L ABA 的培养基中继代培养5 h 的棉纤维为材料 ,用 mRNA 差异显示技术分析其基因表达差异。回收到 20 条 差异条带。利用反向 Northern 杂交鉴别和分析阳性差异条带 ,结果表明 : PG394 在次生壁开始增厚以后表达 ,又被 ABA 诱导表达 ,为质的差异 ;PC391 为 ABA 增强表达 ,PG102 、PG203 和 PC204 为 ABA 减弱表达 ,这 4 个差异条带为量的差 异。BLASTX 分析表明 ,这 5 个 EST 与拟南芥的蛋白激酶、普通烟草的细胞色素 P450 单加氧酶、乙二醛酶 Ⅰ、异黄酮还原 酶同系物和拟南芥的异黄酮还原酶的相似性分别为 51 % 、92 % 、85 % 、44 %和 65 % 。进而推测这 5 个 EST 与棉纤维次生 壁增厚相关。 关键词  棉花 ;纤维发育 ;次生壁增厚 ;差异显示 ;ABA 中图分类号: S562    文献标识码 : A Cloning and Analysis of cDNA Related to the Genes of Secondary Wall Thickening of Cotton ( Gossypium hirsutum L. ) Fiber QIN ZhiXiang  YANG YouMing  ZHANG ChunHua  XU ChuNian  ZHAI ZhiXi ( College of Agronomy Biotechnology , China Agricultural University , Beijing 100094 , China) Abstract  As experimental material cotton ( Gossypium hirsutum L. cv Xuzhou142) fibers and ovules were collected from fieldgrown plants on 14 , 18 , 24 , 30 days postanthesis (DPA) , respectively , and cultured for 12 days and subcultured ( ) μ - 1 ( on the medium contained 0 control or 100 mol ·L ABA for five hours. DDRTPCR mRNA differential display of re verse transcriptionalPCR) was used to

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