药物分析课件供试品前处理与测定方法效能指标.pptVIP

* 第四章 样品前处理与分析方法验证 §1. 定量分析样品的前处理方法 1. 概述 含卤素药物 与芳环连接,牢固； 与脂肪链C连接,不牢固。 含金属 药物 金属盐或配位化合物,如酒石酸锑钾等,不牢固； 金属原子直接与碳原子结合,如卡巴胂,牢固。 2. 不经有机破坏的分析方法 (1)直接测定法：金属原子不直接与碳原子相连，如富马酸亚铁； (2)直接回流后水解测定法： 含卤素药物 +NaOH?回流?间接银量法测定(加过量AgNO3再用 　NH4SCN返滴定) (3)硫酸水解后测定法 (4) 氧化还原后测定法 　a. 碱性还原后测定法，如泛影酸的测定 Na I + AgNO3 ? AgI? +NaNO3 NaOH+Zn粉 回流，? +NaI b. 酸性还原后测定法，如碘番酸的测定 　碘番酸 +HAc +Zn? I- ? 银量法测定 c. 汞齐化法： d. 利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量 Sb5+ Sb3+ + I2 +2K+ H+ KI Fe3+ Fe2+ +I2 H+ KI 3. 经有机破坏的分析方法 有机破坏 方法 4. HNO3-HClO4 法 适用于血、尿、组织等 4. HNO3-H2SO4 法 不适用于含碱土金属有机药物 3. H2SO4 -硫酸盐法 含砷、锑有机药物 2. 灼烧（干法） ? 420 0C 1. 氧瓶燃烧法 不适用于含易挥发性金属有机药物 氧瓶 燃烧法 ? 硬质瓶(测F时用石英瓶) ? 称样 ? 先通氧气后点火 ? 吸收液(H2O或H2O+NaOH等) 碘苯酯 氧瓶燃烧 I2(I-) NaOH I- Br2+HAc IO3- KI I2 S2O32- 滴定 三氯叔丁醇 胆影酸 泛影酸 碘他拉酸 碘番酸 碘苯酯 盐酸胺碘酮 诺氟沙星 醋酸氟轻松 磺溴酞钠 葡萄糖酸锑钠 富马酸亚铁 酒石酸锑钾 汞撒利 卡巴胂 §2. 生物样品分析的前处理技术 目的： (1) 药物进入体内后，经吸收、分布、代谢，然后排出体外。在体 液、组织和排泄物中除了游离型药物之外，还有药物的代谢物、 药物与蛋白质形成的结合物、以及药物或其代谢物与内源性物 质 (如葡萄糖醛酸、硫酸形成的葡萄糖醛酸苷、硫酸酯缀合物)等 多种形式存在，需要分离后测定药物及代谢物； (2) 生物样品的介质组成比较复杂，主要影响是蛋白质。 1. 常用样品的种类、采集和贮藏 1. 血样 ?血浆的制备：将采取的血液置含有抗凝剂(肝素、草酸盐、枸橼酸盐、 EDTA、氟化钠等)的试管中，混合后，以2500?3000rpm 离心5min使与血细胞分离，分取上清液即得。 获取量大 ?血清的制备：将采取的血样在室温下至少放置30min到1hr，待凝结 出血饼后，用细竹棒或玻璃棒轻轻地剥去血饼，然后 以2000 ?3000rpm离心分离5 ? 10min，分取上清液即 得。 获取量少 药物结合型 游离型 能到达靶器官，有疗效 OK! 不能通过血管壁 保存： 短期 4 0C 长期 -20 0C (1) 唾液 由腮腺、颌下腺、舌下腺和口腔粘膜内许多散在的小腺体分泌液混合组成。 ? 1.003?1.008 pH 6.2?7.6 用唾液作为样品 测定药物浓度 的优点 ? 不受时间、地点限制，可反复采集 ? 无痛苦、无危险 ? 有些唾液中药物浓度可以反映血浆 中游离型药物浓度 (2) 尿液 水 尿素 盐 主要成分 采集方式 随时尿 晨尿 白天尿 夜间尿 时间尿 自然排尿 立即测定，超过 24hr应加防腐剂 (苯、甲苯、醋酸、浓HCl) 2. 生物样品分析前处理技术 根据生物样品的类型进行分离、纯化。如血浆或血清需除蛋白，使药物从蛋白质结合物中释放；唾液样品则主要采用离心沉淀除去粘蛋白；尿液样品常采用酸或酶水解使药物从缀合物中释出，当原型药物排泄在尿中时，可简单地用水稀释一定倍数后进行测定。 ? 样品处理步骤与分析方法的选择 (1) 去除蛋白质： a. 加入与水相混溶的有机溶剂，如乙睛、甲醇、乙醇、 丙醇、丙酮、四氢呋喃，使蛋白质分子内及分子间 的氢键发生变化而使