分子生物学方法在食品微生物检测中的应用(精).docVIP

分子生物学方法在食品微生物检测中的应用 刘雨潇 , 刘士敏 , 王民 , 于瑞敏 , 胡冰冰 北京军区 疾病控制中心 , 北京 100042[摘要 ] 近年来 , 食品安全受到广泛关注 。 及时 、 准确地检测出食品中的病原微生物是食品安全检测的重要内容 , 食品病原 微生物的分子生物学检测技术因其特异性和灵敏性而备受瞩目 。 我们主要介绍了基因探针检测法 、 PCR 检测法和基因芯片 检测法的原理 、 开发及其在食品微生物检测中的应用 。 [关键词 ] 食品微生物检测 ; 基因探针 ; PCR 技术 ; 基因芯片 [中图分类号 ] Q789[文献标识码 ]A [文章编号 ]1009-0002(200901-0451-04 Application of Molecular Biology Methods in Food Microbiological Detection LIU Yu-Xiao, LIU Shi-Min, WANG Min, YU Rui-Min, HU Bing-Bing Center for Disease Control of Beijing Military Region, Beijing 100042, China [Abstract ] Recently, food safety has got more and more attention. Rapid and accurate detection of pathogenic microor- ganism in food is an important part of food safety detection. Nowadays, molecular biology methods are outstanding because they have the advantages on specificity and sensitivity. In this article we introduced the principle, development and appli-cation in food microbiological detection of three common molecular biology methods, gene probe, PCR and gene chip. [Key words ] food microbiological detection; gene probe; PCR; gene chip 综 述 doi:10.3969/j.issn.1009-0002.2009.02.041 食品安全性要求食品中不应含有可能损害或威胁人体的物 质或因素 , 它关系到人体健康和社会稳定 。 随着世界经济全球 化 、 贸易自由化和食品国际贸易的迅速发展 , 食品安全已成为事 关人民健康和构建和谐社会的重大战略问题 , 及时 、 安全 、 准 确 地检测出食品中的病原微生物是食品安全检测的重要内容 。 传 统的病原微生物检测方法步骤繁多 、 效率低下 , 且难以检测生长 缓慢或新型的病原微生物 。 因此 , 人们期待更加快速 、 准确的检 测方法 。 近年来 , 基因探针检测法 、 PCR 检测法和基因芯片检测 法等分子生物学方法因其检测的特异性和灵敏性而 备 受 瞩 目 , 成为食品安全监督的有力工具 。 1基因探针检测方法 基因探针技术又称核酸分子杂交技术 , 该技术发明于 1968 年 , 由华盛顿卡内基学院的 Britten 等共同创建 。 它是分子生物学 中 DNA 分析方法的基础 , 也是当今分子生物学技术中应用最为 广泛的一种 。 基因探针是带有标记的基因特异片段 。 基因探针检测技术 主要利用碱基配对原理 , 使互补的 2条核酸单链通过退火形成 双链 。 近年来基因探针技术已被广泛应用于食品微生物的检测 中 , 可灵敏 、 快速 、 直接地检测出致病性微生物 , 不受非致病性微 生物的影响 [1-3]。 每一种病原体都有独特的核酸片段 , 通过分离和标记这些 片段就可制备出探针 , 利用带有标记物的已知序列的核酸探针 , 与待测样品进行杂交 , 如样品中含有特定病原体 , 探针将与目的 核酸序列特异结合 , 最后使用特定的方法测定标记物 , 便可确定 样品中有无特定病原体 。 基因探针检测技术不仅具有特异性 、 灵 敏度高的优点 , 而且兼备组织化学染色的可见性和定位性 。 核酸 探针技术主要用于食品中致病性病原菌的检测 。 目前 , 国内外研究者已开发出多种基因探针用于食品微生 物的检测 。 Moseley 等 以 生 物 素 标 记 的 沙 门 菌 基 因 片 段 作 为 探 针 , 对食品中