FCM流式细胞术检测原理及临床的应用.pptVIP

FCM的工作原理 流式细胞仪组成： 1.液流系统 2.光学系统 3.数据处理系统 鞘液：辅助样本流能被正常检测的基质液 作用： 1.包裹在样本流的周围，使其处于喷嘴中心，以保证检测的精确性； 2.防止样本流中的细胞靠近喷孔壁而堵塞喷孔。 2.光学系统：由激发光源、分光镜、光束成形器等组成。 激光是较常用的光源, 稳定性好、单色性好。 检测信号： 散射光和荧光信号被收集、处理、转化为数字信号。 FCM检测信号 散射光信号 前向散射光（foword scatter, FS）：在激光束正前方的检测器，用于检测细胞或其他粒子物体的表面属性，如大小、形状等。反映细胞颗粒的大小。 侧向散射光（side scatter， SS）：与激光束垂直方向的检测器为侧向检测器，主要用于检测细胞内部结构属性，可获得细胞内超微结构和颗粒性质的参数。反映颗粒的内部结构复杂程度、表面的光滑程度。 荧光信号 (反映被染上荧光的细胞数量多少） 荧光信号 每种荧光染料都有特定的激发波长，受激光激发后会产生特定波长的荧光和颜色，如绿色、红色、黄色等。流式细胞仪就是利用不同波长的光学滤片来检测这些特定发射波长的光学信号。 荧光信号反映被染上荧光的细胞数量多少。 3.数据处理系统：主要由计算机及其软件组成。 通过检测散射光及荧光信号对实验数据进行分析 存储、显示。 具有智能化、自