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--- -------- 索氏抽提法实验报告 一、实验目的 了解索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理； 掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量操作方法； 测定脂肪的含量，可以作为鉴别样品品质优劣的一个指标。 二、实验原理 脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。 目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（ Soxhlet extractormethod ）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。 本实验采用索氏抽提法中的残余法， 即用低沸点有机溶剂 （乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪， 以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。 由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外， 还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。 三、实验试剂和器材 实验材料 油料作物种子 ( 花生 ) 、中速滤纸 . 仪器 SZF-06A 脂肪仪 干燥器 ( 直径 15～18cm，盛变色硅胶 ) ③ 不锈钢镊子（长 20cm） ④ 培养皿 ⑤ 分析天平 ⑥ 称量瓶 ⑦ 恒温水浴 ⑧ 烘箱 ⑨ 样品筛（ 60 目） 试剂 无水乙醚或低沸点石油醚（ A.R. ） 四、操作步骤 准备 ① 将滤纸切成 4cm×4cm，叠成一边不封口的纸包，用硬铅笔编 写顺序号，按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入 105 2℃烘箱中干燥 2h，取出放入干燥器中，冷却至室温； 按顺序将各滤纸包称重（记作 a）、( 称量时室内相对湿度必须低于 70％) 。 包装和干燥 ① 将花生研碎 , 放入 105±2℃的烘箱中干燥 3h，移至干燥器中 冷却至室温； ② 称取约 0.5g 左右研碎的样品放入上述已称重的滤纸包中装 入，封好包口，按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作 b）。 抽提 ① 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，向其中注入一次虹吸量的 1.67 倍的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中； ② 连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行 抽提，调节水温为 60℃，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（ 10min-15min 虹吸一次），抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约 6～12h, 本次实验 1h）； 抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包， 在通风处使乙醚挥发 （抽提室温以 12～25℃为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。 称重 ① 待乙醚挥发之后，将滤纸包置于 65℃烘箱中干燥 15min，放入干燥器冷却至恒重为止（记作 c）。 五、实验结果 粗脂肪含量（％） b - c 100 b - a 式中： a：称量瓶加滤纸包重（ g） ：称量瓶加滤纸包和烘干样重（ g） ：称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重（ g） 由实验得数据： a：称量瓶加滤纸包重（ g） 0.23 b：称量瓶加滤纸包和烘干样重（ g） 0.84 c：称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重 （g） 0.48 粗脂肪含量（％） b - c 100 b - a 0.84- 0.48 100 0.84- 0.23 59.02％ 即本次试验得粗脂肪含量为： 59.02 ％ 六、注意事项 测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二， 抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约 2％的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部， 结果不易将脂肪抽提干净； 试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果； 索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长， 如能将样品先回 1～2 次，然后浸泡在溶剂中过夜，次日再继续抽提，则可明显缩 短抽提时间； 4.YG- Ⅱ型油分测定器容量大，适合于样品较多的选种鉴定工作 使用，温度控制在 70℃左右， 8h 可提取完毕； 必须十分注意乙醚的安全使用。 抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆； 乙醚中过氧化物的检查方法是： 取适量乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置 1min，若出现黄色则表明存在过氧化物，应进行处理后方可使用。处理的方法是：将乙醚放入分液漏斗，先以 1/5 乙醚量的稀 KOH溶液洗涤 2～3 次，以除去乙醇；然后用盐酸酸化，加入 1/5 乙醚量的 FeSO4 或 Na2SO3溶液，振摇，静置，分层后弃去下层 水溶液，以除去过氧化物； 最后用水洗至中性，用无水 CaCl2 或无水 Na2SO4脱水，并进行重蒸馏。 七、思考与讨论 如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量？ 答：残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量