第6章 光学显微分析.pptVIP

前言 光学显微分析的发展 15世纪中叶：放大镜（单式显微镜） 1590年荷兰Hans and Zacharias Janssen：复式显微镜 17世纪中叶R. Hooke：设计第一台性能较好的显微镜 Christiaan Huygens：惠更斯目镜 19世纪德国Ernst Abbe阐明光学显微镜成像原理，光学显微镜分辨本领达0.2微米理论极限 光学显微镜分类 ——几何光学显微镜 生物显微镜、落射光显微镜、倒置显微镜、金相显微镜、暗视野显微镜等。 ——物理光学显微镜 相差显微镜、偏光显微镜、干涉显微镜、相差偏振光显微镜、相差干涉显微镜、相差荧光显微镜等。 ——信息转换显微镜 荧光显微镜、显微分光光度计、图像分析显微镜、声学显微镜、照相显微镜、电视显微镜等。 ——特种光学显微镜 高温显微镜、近场光学显微镜等。 一、晶体光学基础 光的波动性 光的波粒二象性 波动学说解释晶体光学 电磁波谱 2. 自然光和偏振光 ——自然光：垂直于光的传播方向振动，在垂直于光的传播方向的平面内的任意方向振动。 ——偏振光：垂直于光的传播方向振动，且只在垂直于光的传播方向的平面内的某一方向振动。 3. 光的折射 光的折射定律 4. 光在晶体中的传播 光性均质体与非均质体 ——光性均质体 (各向同性介质) 光波在均质体中传播时，其传播速度不因振动方向而发生改变。 ——光性非均质体(各向异性介质) 光波在非均质体中传播时，其传播速度随振动方向不同而发生变化。 一轴晶和二轴晶。 * * 授课内容三 显微分析技术 第六章 光学显微分析 罗伯特·虎克制造的显微镜（1665） 罗伯特·虎克观察 到的细胞 1665 列文虎克和他的显微镜（约1680） 列文虎克观察到的“小动物” 光学显微镜 透射光显微镜 相位差显微镜 反射光显微镜 解剖显微镜 纵波 横波 电磁波谱 可见光： 3900-7700埃 横波与纵波 光学显微分析 使用波段： 可见光波段 390~770nm 光的折射特点： （1）介质中光传播的速度愈大，则该介质的折射率愈小； （Vi/Vr=Nr/Ni）。 （2）光在真空中的传播速度最大，n1 （3）同一介质的折射率因所用光波波长而异（折射率色散） 对于同一介质，光波的波长与折射率成反比。 （4）晶体的折射率色散能力 晶体在两种波长光波中的折射率差值越大，色散能力越 强，液体的色散能力较固体强。 * * * 【图片说明】 1590年代荷兰眼镜制造商J.Janssen和Z.Janssen父子制作了第一台复式显微镜，尽管其放大倍数不超过10倍，但具有划时代的意义。 【图片说明】 1665 英国人Robert Hook用自己设计与制造的显微镜（放大倍数为40-140倍)观察了软木（栎树皮)的薄片，第一次描述了植物细胞的构造，并首次用拉丁文cella（小室)这个词来称呼他所看到的类似蜂巢的极小的封闭状小室（实际上只是观察到到纤维质的细胞壁)。 【图片说明】 1680荷兰人A. van Leeuwenhoek成为皇家学会会员，一生中制作了200多台显微镜和500多个镜头。他是第一个看到活细胞的人，观察过原生动物、人类精子、鲑鱼的红细胞、牙垢中的细菌等等。 【图片说明】 光学显微镜 1、复式显微镜(compound microscope) 利用穿透光，也就是光线透过物体再进入眼，因此，观察的物体必须很薄，成透明状时，光线才能穿透，常需染色。通常显微切片，先将标本固定、封蜡，再利用切片机将标本切为5~15μm的厚度，最佳复式显微镜倍率不超过1000X，解像力约为人眼的500倍。