微生物生长量的测定.ppt

（一）菌种的退化 菌种退化是指由于自发突变而使某物种原有的一系列生物学性状发生量变或质变的现象。 1．菌种退化的现象 菌种衰退的具体表现有以下几个方面： （1）菌落和细胞形态改变。 （2）生长速度缓慢，产孢子越来越少。 （3）代谢产物生产能力的下降，即出现负突变。 （4）致病菌对宿主侵染能力下降。 （5）对外界不良条件抵抗能力的下降等。 二、菌种的退化与复壮 2．菌种退化的原因 （1）基因突变 （2）连续传代 （3）不适宜的培养和保藏条件 （4）长期低温保藏? 3．防止菌种衰退的措施 （1）控制传代次数 （2）创造良好的培养条件 （3）利用不易退化的细胞移种传代 （4）采用有效的菌种保藏方法 （5）定期进行分离纯化 （二）菌种的复壮 退化菌种的复壮可通过纯种分离和性能测定等方法来实现，其中一种方法是从退化菌种的群体中找出少数尚未退化的个体，以达到恢复菌种的原有典型性状。另一种方法是在菌种的生产性能尚未退化前就经常有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作，以达到菌种的生产性能逐步提高。所以这些方法实际上是一种利用自发突变不断从生产中进行选种的工作。具体的菌种的复壮措施如下： 1．纯种分离法 2．宿主体内复壮法 3．淘汰法 4．遗传育种法 【本章小结】 微生物的生长是一个复杂的生命活动过程，它包括个体生长和群体生长两个层面。研究微生物的生长状况不仅要看个体细胞质量的增加，同时要看群体细胞数目的增加，由于研究微生物个体的生长有一定的困难，因此研究微生物的生长一般研究其群体生长。微生物的生长受物理因素和化学因素的影响，掌握微生物的生长规律和环境条件对微生物的影响，对于利用微生物有着十分重要的指导意义。 菌种是一个国家的重要自然资源，菌种选育是微生物学研究的一项基础工作，诱变育种、原生质体融合育种和基因工程育种是微生物育种常用的基本方法，其中诱变育种是最常用的工业育种技术。优良的菌种来之不易，是珍贵的财富，防止菌种的退化以及对菌种进行复壮和保藏是微生物遗传育种的基础，也是微生物实验的基本操作。 3．氧化剂 氧化剂可通过对细胞成分的氧化作用达到杀菌目的。 常用的氧化剂有高锰酸钾和过氧化氢，前者常用作卫生和实验室消毒，后者还可用作食品包装材料和镜片的杀菌。 4．碱类 碱类包括氢氧化钠、氢氧化钾、生石灰等碱类物质。 其作用机理是氢氧根离子可以水解蛋白质和核酸，使微生物的结构和酶系统受到损害，同时可分解菌体中的糖类而杀灭细菌和病毒。 （三）表面活性剂 能降低表面张力的物质称为表面活性剂，这类物质加入到培养基中，可影响细胞的生长与分裂。 表面活性剂能聚集在菌体表面，引起菌膜损伤并和菌体蛋白作用表现出杀菌能力。 胆汁、胆盐、肥皂、洗衣粉都是表面活性剂，还有一些人工合成的阳离子表面活性剂如洗必泰、新洁尔灭。 （四）化学治疗剂 化学治疗剂是一类能选择性的抑制或杀死人畜和家禽体内的病原微生物并可用于临床治疗的特殊化学药剂。 化学治疗剂与杀菌剂或抑菌剂不同，可以内用。化学治疗剂主要有抗代谢物和抗生素。 三、工业上常用的微生物培养技术 工业上常用的微生物培养技术主要有分批培养、连续培养和补料分批培养。 （一）分批培养 在一个相对独立密闭的系统中，一次性投入培养基对微生物进行接种培养的方式一般称为分批培养。由于它的培养系统的相对密闭性，故分批培养也叫密闭培养。由于它的相对简单与操作方便，在微生物学研究与发酵工业生产实践中仍被广泛采用。 （二）连续培养 若将新鲜的培养基连续加入均匀搅拌的培养物中，同时排出含有细胞和发酵产物的发酵液，就可进行连续培养，并可在较长的时期内维持生长。为研究微生物对环境的影响以及在最佳环境条件下连续生产细胞和代谢产物提供了一种独特的方法。 连续培养的一个重要特征是使微生物的增殖速度和代谢活性处于某种稳定状态。连续培养的方法大致可以分为两类，即恒化器法和恒浊器法。“恒化”指的是恒定的化学环境，“恒浊”指的是恒定的细胞浓度。 恒化器和恒浊器装置相似，都有一个恒定体积的培养容器，并且都是依靠流加和排出来维持培养槽内液体体积的恒定，只是培养过程中对微生物生长的控制方法不同。图6-21为简单的恒化器和恒浊器的示意图。 图6-21 恒化器与恒浊器简图 恒化器法与恒浊器法都是在一固定容器内培养微生物，当微生物进入对数生长期时，要不断地加入新鲜的培养基，同时流出培养物，以使培养器中培养物的体积保持恒定。 恒化器是通过调节培养液的流速来进行控制的，其最基本的操作条件是由流速决定的稀释速率不等于或不超过微生物的最大生长速率。 恒浊器可以在恒化器的基础上添加浊度控制仪而构成。 发酵工业上采用多罐串联连续培养的方法，可以大大缩短发酵周期，提高设备的利用率。 （三）补料分批培养 补料分批培养是根据菌株生长和初始培养基的