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B族链球菌产前筛查及临床意义 1北京惠兰医院检验科；2北京协和洛奇牛物医药有限公司临床微牛物实验室 摘要：根据国内外研究报导：B族溶血性链球菌(GBS),是引起新牛儿肺炎，脑 膜炎，脓毒性败血症的重要的病原菌之一(1)?(5)0它存在于正常健康成年女 性的生殖道，胎儿可在分娩过程中感染GBSo或GBS直接间接通过胎盘绒毛侵入 胎膜内感染胎儿(6)。由于GBS引起新牛儿早发型败血症与晚发型感染临床进 展迅速，死亡率高(2)?(5)o因此妊娠期对GBS感染的筛查，对阳性者采取有 效的预防性治疗，对预防和降低新牛儿早发型败血症和晚发型感染具有重要的意 义。木试验检测了美中宜和妇儿医院和东方美华妇儿医院2010年1月至20M 年12月共3559例孕期妇女牛殖道分泌物，243例检击B族链球菌，细菌携带率 为6.8%,共分离得到38个GBS菌株。药敏结果显示66%的GBS对青霉素敏感, 中介占34%。80%对氨节西林敏感，中介占20%o 100%和99%GBS对头泡咲辛， 头砲哇咻敏感。对亚胺培南和美洛霉素敏感菌占100%和98%oGBS对 阿奇霉素、 米诺环素、和四环素呈较高的耐药性，耐药菌占68%、77%、和80%o木研究提 示细菌培养鉴定法是一个可靠的诊断GBS感染的方法。青霉素、氨节青霉素可 作为常规预防GBS感染的首选药物。木硏究有助于指导GBS携带孕妇药物应用, 对预防或降低新牛儿早期GBS败血症有重要的意义。 关键词：B群链球菌；早发型败血症；新牛儿感染；预防性治疗 材料与方法 一、材料来源 木试验检测美中宜和妇儿医院和东方美华妇儿医院2010年1月至2011 年12月3559例孕期妇女牛殖道分泌物GBS,行GBS增菌和分离培养。增菌液中 的蔡噪酸和多粘菌素B由北京陆桥技术有限责任公司提供。BAPI 20Strep链球菌 鉴定试条由生物梅里埃中国有限公司■北京分公司制备，药敏纸片由北京天坛药 物牛物技术开发公司制备。羊血培养皿和羊血培:养皿由天津市金章科技发 展有限公司制备。标准金黄色葡萄球菌ATCC25923,无乳链球菌ATCC12386由中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心提供。 二、 方法（1） 1.B族链球菌增菌及分离培养 无菌操作下，用灭菌棉试纸取孕期阴道分泌物，加入已配制好的脑心侵 液培养管中，此培养基中含奈噪酸和多粘菌素B以便抑制G?杆菌的生长，将管 置5%-10%CO2培养箱，37C, 24小时后分区划线法接种于Columbia羊血琼脂平 板上，置上述培养箱中37C, 24小时培养。观察菌落生长形态和溶血情况。选择 特异形态菌落进行下一步试验。 2 ?触酶试验 加一滴3%过氧化氢溶液于载玻片上，用牙签取1-2个菌落置于溶液上 观察有无气泡产生。有气泡产生为阳性，没有为阴性。 CAMP协同试验 用标准的链球菌株作为阳性对照和ATCC25923葡萄球菌菌株垂直画线 接种于血琼脂培基上，两线不能相交，再将待测菌落平行接种于标准链球菌旁, 37C, 24小时后观察在葡萄球菌与链球菌交界处有无箭头型溶血区，有为阳性。 协同试验同时进行链球菌纯培养。 API20 STREP链球菌鉴定试验。 取CAMP试验阳性的新鲜纯培养菌于无菌蒸惚水中制成细菌悬液，其浊 度相当于0.5 McFarland标准混浊度，取适量细菌悬液接种于API 20Strep试验条 ± 35-37C培养4小吋得到第一次结果，如需要可在24小吋读第二次结果。 K-B纸片扩散法药敏鉴定 取上述细菌悬液0.5ml悬浮于一安瓶API20 Strep培养基中，均匀涂布于 5%羊血平板琼脂上3次，每次旋转60deg;角，最后沿平板内缘涂一周， 待3-5分钟菌液干后，用无菌银子将含药纸片均匀贴于涂布细菌的琼脂平皿上, 35-37°C24小时读取。 三、 结果 1.本文对3559例围产期妇女生殖道分泌物行B族链球菌分离培养，细 菌鉴定，及药敏试验。243例分离得倒GBS。细菌携带阳性率为6.8%。共分离得 到38个B族链球菌菌株。 四、讨论 lo国内外文献报导GBS是新生儿肺炎，脑膜炎，脓毒败血症等一系列 感染的主要致病菌之一(2) (3) (4)。由于GBS引起的新生儿早发型感染与晚 发型感染临床进展迅速，死亡率高。有文献报导GBS导致新生儿早发型败血症 死亡率达68% (4)o因此围产期筛查GBS并预防性清除GBS对于预防和降低新 生儿早发型和晚发型GBS感染有重要意义。美国CDC建议妇女在怀孕35周?37 周常规筛查GBS (5).本实验参考美国临床实验室标准协会关于抗菌药物敏感性 试验标准第二十三版，按临床需要选用18种抗菌素进行药敏实验。本实验方法 目前仍是诊断和鉴定GBS可靠易行的方法。 2o国内关于GBS携带率的报导存在很大的差异从4%到29%o