疑难问题研讨.ppt

疑难问题探究 杭四中吴山校区 一、转录过程需要的酶 原核生物靠RNA聚合酶就可完成从起始、延长、终止的转录全过程，真核生物转录起始十分复杂，需要多种蛋白因子的协助，细胞中有一类转录因子可与RNA聚合酶Ⅱ形成转录起始复合物，共同参与转录起始过程。 真核生物的RNA聚合酶 RNA聚合酶Ⅰ位于核仁中，负责转录编码rRNA的基因（细胞内绝大部分RNA是rRNA）。 RNA聚合酶Ⅱ位于核基质中，负责核内不均一RNA的合成，而hnRNA是mRNA的前体。 RNA聚合酶Ⅲ负责合成tRNA和许多小的核内RNA。 二、静息电位和动作电位 1. 在离体实验条件下单条神经纤维的电位示意图如下，下列叙述正确的是 A. a—b段的Na+内流是需要消耗能量的 B. b—c段的Na+外流是不需要消耗能量的 C. c—d段的K+外流是不需要消耗能量的 D. d—e段的K+内流是需要消耗能量的 超极化 概念：是指跨膜电位处于较原来的参照状态 (如静息状态)下的跨膜电位更负(膜电 位的绝对值更高)的状态。 三、基因工程获得目的基因的方法 1.获取目的基因的方法有多种，下列不属于目的基因的获取方法的是 （ ） A从基因组文库中获取 B从cDNA文库中获取 C从含目的基因生物细胞中获取 D利用PCR技术获取 浙教版选修三 一、目的基因序列已知： 1.化学方法合成； 2.PCR扩增； 二、目的基因序列未知： 基因文库法 普通生物学 1.限制性内切酶酶切产生待克隆片段（鸟枪法，构建 基因文库）； 2.人工合成DNA（基因序列已知）； 3.逆转录酶酶促合成法（已知组成和功能的片段）； 4.PCR扩增特定的基因片段 一、目的基因序列已知： 1.化学方法合成； 包括人工合成及逆转录法 2.PCR扩增； 二、目的基因序列未知： 1. 基因文库法（基因组文库和cDNA文库） 2. 鸟枪法 综合 1、 限制性内切酶酶切 （1）鸟枪法（2）构建基因组文库：直接分离法（3）构建部分基因文库如cDNA文库：反转录法 2、PCR扩增 3、人工合成其实有两种：（1）反转录法；（2）化学方法人工合成；针对目的基因序列已知且较小的情况。 * 与RNA PolⅡ联合的转录因子有TFⅡA、TFⅡB、TFⅡD、TFⅡE、TFⅡF和TFⅡH等6种。 TFⅡH利用ATP的能量解开双螺旋。 可能引起超极化的因素 　　 1.突触后膜受抑制性传递物质作用，由于k+外流Cl-内流引起。 　　 2.在动作电位之后，由于k+的过度外流引起，称为复极后超极化，时间短暂。 新人教选修三 1、从基因文库中获取； 2、PCR扩增； 3、化学方法人工合成 。 *