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实验二 细胞器的观察 一、实验目的 1. 掌握线粒体活体染色原理。 2. 掌握光学显微镜下线粒体、高尔基复合体的 基本形态特征。 3. 熟悉线粒体、高尔基复合体的观察方法。 4. 了解线粒体的活体染色的方法。 二、实验用品 兔脊神经节切片标本、洋葱鳞茎、人口腔黏膜上皮细胞、光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、牙签、剪刀、吸管、擦镜纸、吸水纸、二甲苯、香柏油、1/5000詹纳斯绿B染液（生理盐水配制）。 三、实验原理 1. 高尔基复合体在光镜下呈网状、点状或线状结 构。神经组织切片中的高尔基复合体被硝酸银染成棕褐色，可在光镜下看到其形态。 三、实验原理 2. 线粒体是细胞内物质氧化和能量转换的主要场所，细胞的各项生命活动所需的能量主要是由线粒体提供的。詹纳斯绿B（Janus Green B）是线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态而呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。核染色较浅。在光镜下很容易观察到这种呈现特殊颜色的线粒体。 四、实验方法 1. 人口腔黏膜上皮细胞线粒体的活体染色及观察 将洁净的载玻片平放在实验台上，滴2滴詹纳斯绿B染液于玻片中央，用消毒牙签刮取口腔颊部黏膜细胞于染液中混匀，染色5～10min，加盖玻片后观察。在高倍镜或油镜下可见在接近无色的口腔黏膜上皮细胞的细胞质中散布着一些蓝绿色的短杆状或颗粒状的线粒体。 四、实验方法 2. 洋葱细胞线粒体的活体染色及观察 将洁净的载玻片平放在实验台上，滴2滴詹纳斯绿B染液。用镊子小心撕下一块5×5mm的洋葱鳞茎内表皮，使其平展于染液中，染色9～10min，吸管吸取蒸馏水滴于染色的载玻片上，冲淡染液，盖上盖玻片，再用吸水纸吸去多余水分。在高倍镜或油镜下可见到蓝绿色颗粒状或线状结构，即为线粒体。 五、作业 1. 绘制光镜下线粒体、高尔基复合体的形态图。 2. 线粒体活体染色的原理是什么？ * *