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实验二 凝集试验 一、目的 熟悉玻板凝集试验的操作方法 掌握凝集反应中阴阳性结果的判定 凝集试验 细菌、红细胞等颗粒性抗原,或吸附在红细胞、乳胶颗粒性载体表面的可溶性性抗原,与相应抗体结合,在有适当电解质存在,经过一定时间,形成肉眼可见的凝集团块,称为凝集试验。 参与凝集反应的抗原称凝集原,抗体称为凝集素 直接凝集试验 间接凝集试验 玻片凝集反应试验 颗粒性抗原与其特异性抗体在电解质存在下于玻片上出现肉眼可见的凝集小块 用已知的标准血清鉴定颗粒性抗原 二、材料 嗜水汽单胞菌阳性血清、嗜水汽单胞菌玻板凝集抗原、PBS 载玻片、微量加样器、tip头等 三、步骤 玻板凝集试验 吸取20μL PBS至玻片上; 将抗体按二倍比稀释法稀释成1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,最后一孔为PBS对照 吸取20μL大肠杆菌 37℃作用5-10min,观察结果 阳性应出现颗粒样凝集物,阴性对照不出现反应 * * 颗粒性抗原与相应抗体直接结合并出现凝集现象的试验称为直接凝集试验。 直接凝集反应 颗粒性抗原 凝集素 将可溶性抗原(或抗体)先吸附于一种与免疫无关的、一定大小的不溶性颗粒(统称为载体颗粒)的表面,然后与相应抗体(或抗原)作用,在有电解质存在的适宜条件下,所出现的特异性凝集反应称为间接凝集反应,以此建立的检测方法称为间接凝集试验。 *
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