试验五血液分析仪的使用和结果分析.doc

实验五 血液分析仪的使用和结果分析 Usage and Result Assessment of Hematology Analyzer 实验原理 电阻抗型血细胞分析仪原理：仪器的小孔管有内外两个电极，在接通电源的电解质溶液中，内、外电极之间形成一个稳定的电流。细胞悬液经负压吸引通过小孔管上的宝石计数小孔时，由于血细胞具有相对非导电的特性，使电路中小孔感应区内的电阻突然增大，引起瞬间电压变化而形成脉冲信号。这些脉冲信号经过放大、阈值调节、甄别、整形、计数及自动控制保护系统，完成对血细胞进行计数和体积的测定，自动打印出结果。脉冲信号的强弱反映细胞体积的大小，脉冲信号的多少反映细胞的数量。仪器的光电比色装置可测定血红蛋白浓度。 1．红细胞分析 （1）细胞计数：与血小板在同一通道进行检测。采用阈值调节和浮动界标法区分红细胞与血小板。通道内的细胞介质为等渗、近中性的电解质溶液。 （2）血红蛋白测定：在白细胞通道内进行。红细胞被溶血剂破坏后，释放出的血红蛋白转化为血红蛋白衍生物，吸收峰在530nm～550nm之间，仪器内有流动比色装置进行测定。因ICSH推荐使用HiCN法进行仪器矫正，故采用的溶血剂中多含氰化物，形成氰化血红蛋白；为避免环境污染，也可以采用不含氰化物的溶血剂，如SLS-Hb法。 （3）红细胞参数分析：①MCV、RDW：仪器取自近万个红细胞体积的检测数据，由统计学运算得到的平均值和变异系数。②HCT：MCV与红细胞计数的乘机。③MCH、MCHC：计算方法与手工法相同。 2．白细胞分析 （1）白细胞计数：白细胞通道有滴加溶血素的装置，破坏红细胞后方可进行白细胞计数。 （2）白细胞分群：溶血素在破坏红细胞的同时，也改变了白细胞膜的通透性，使细胞内液外溢而引起了白细胞体积的改变，此时细胞体积的大小取决于细胞内颗粒的含量和细胞核的大小。将白细胞分成2群～3群，可计算出各自百分率及绝对值： 小细胞群：30fl～90fl，以淋巴细胞为主。因淋巴细胞核较小，细胞质最少。 中间细胞群：90fl～160fl，主要包括嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞。嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞颗粒较淋巴细胞丰富；单核细胞核体积最大但胞质颗粒并不丰富。 大细胞群：160fl～450fl，以中性粒细胞为主。中性粒细胞颗粒最丰富。 3．血小板分析 （1）血小板计数：与红细胞在同一通道进行检测。 （2）血小板参数分析：①MPV和PDW：原理同MCV和RDW。②PCT是PLT和MPV的乘积 4．血细胞体积分布直方图：血细胞分析仪的微电脑以各种细胞的体积为横坐标，相应大小的细胞所占百分率为纵坐标绘制成的3个拟合曲线。分别反映各类血细胞的群体分布情况。 试剂与器材 校正后的电阻抗型血细胞分析仪、配套试剂和消耗品（样品杯、抗凝管、采血器材、消毒纱布或纸巾）。 操作步骤 1．启动仪器、准备器材。 2．采血、稀释 毛细血管血和静脉血都可使用，采血方法同第一章实验1，抗凝剂首选EDTA-K2。毛细血管血可随时进行预稀释，也可先转移到盛有抗凝剂的带盖容器中等待集中测定。如使用静脉血测定，多采用机内自动稀释，测定前需注意转换仪器的测定模式。 3．上机测定，具体的仪器按说明书操作。仪器将自动对标本进行测试并打印结果。 4．记录结果、关机。 注意事项 1．确认仪器在正常工作状态 （1）稀释液空白计数各项指标应达到说明书要求。 （2）测定低、中、高定值的全血质控标本或单项指标质控标本时，其结果应在之内，或质控图处于质控状态。 （3）检测标本时，仪器计数时间在规定范围内，无堵孔现象。防止堵孔的措施有①采血顺利，及时混匀。②防止消毒棉或纸巾上的纤维物质混入血液中。③保证稀释液清洁无污染。④疑为冷凝集的标本，可在37℃温箱温育后测定。 2．坚持检查结果审核复查制度 对已确诊或怀疑血液病、发热待查患者的标本，无论检查参数及直方图是否正常，均应进行血涂片的显微镜检查。对白细胞计数和分类异常的标本、血小板严重减少或显著增加的标本，也应进行复查。 3．严格按照操作手册使用仪器并作好仪器使用登记。 4．定期保养仪器。 参考范围 仪器型号不同，所提供的参数数量和直方图的图形也不尽相同。但各项参数的数值（见表2-9）与手工检测结果差异不大。 表2-9 血细胞自动分析仪提供的参数和直方图（以成人为例） 项目（英文缩写） 参考值 报告方式 白细胞数(WBC) 4～10（静脉血3.5～9.5） ×109/L 红细胞数(RBC) M：4.0～5.5；F：3.5～4.0 ×1012/L 血红蛋白(Hb or HGB) M：120～160；F：110～150 g/L 血红细胞比容(HCT or PCV) M：0.4～0.5；F：0.3.7～0.48 L/L 平均红细胞体积（MCV） 80～100 fl 平均红细胞