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10.1 中心法则 生物的遗传信息从 DNA 传递给mRNA的过程称为 转录。根据mRNA链上的 遗传信息合成蛋白质 的过程,被称为翻译 和表达。 1958年Crick将生物遗传信息的这种传递方式称为中心法则。。 10.2 DNA的复制一、DNA复制原则——半保留性复制 DNA复制方式有三种可能性,即全保留、半保留和分散式。 Meselson等的氮同位素试验 证明了DNA复制为半保留复制机理。 二、 DNA复制方向 单向复制,即只形成一个复制叉(replication fork) 双向复制,即形成两个复制叉。如E.coliDNA等。 三、复制起始点(origin) 原核DNA只有一个复制起始点(ori),而真核DNA上一般有多个ori。现细菌、酵母以及线粒体、叶绿体的DNA复制起始点已克隆,并测序,发现其共同点都富含A、T序列,认为这可能与复制起始时起始点处DNA双螺旋的解旋有关,是引发复制的蛋白因子的结合部位。 四、 DNA复制方式 凯恩斯模型(?型)( Cairns model ) 双链环状DNA的复制方式。 3. 染色体DNA复制方式 多复制子复制,即DNA上先形成多个复制眼,双向复制。“眼”扩大互相相连,形成“大眼睛”最后完成整个DNA的复制,形成两个DNA分子 五、DNA的半不连续复制 双螺旋DNA两股链的极性是相反的,因此在复制叉上进行互补链的合成极性也应是相反的。但现发现的DNA聚合酶的作用都是5′→3′聚合。 在复制过程中如何解决这一问题? 六、 DNA复制系统 DNA复制系统是指参与DNA复制的酶和蛋白因子。 1. DNA聚合酶:催化反应的要点: 底物:四种dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP) 模板:DNA单链 聚合方式:按照碱基配对原则,将相应dNTP的5′磷酸与上一个核苷酸的3 ′羟基形成3 ′- 5′磷酸二酯键,即合成方向为5 ′→3′,与模板链反平行 。 条件:聚合反应必须有引物存在。 (1)大肠杆菌DNA聚合酶:共有三种, 为DNA聚合酶 I、II、III。 2. 引物酶(primase) 功能:以DNA为模板,催化合成一小段与DNA互补的RNA ,即引物。引物:10—60个核苷酸 引物酶本身无活性,只有与另外6种蛋白质结合为引发体(primosome)才可催化引物的合成。 dnaB是六聚体。在ATP、Mg2+存在时可与6个dnaC结合成复合体。此复合物在i-蛋白协助下与结合在单链DNA上的n、n’、n”组成引发前体。引发前体再与引物酶结合则形成引发体。 n’可选择DNA特定位置在其上组装引发前体和引发体。引发体可沿DNA链5’→3’移动到一定位置即可合成引物。移动和引发由ATP供能n’有ATP酶活力。DnaB可识别与DNA结合的起始位置。 引发体蛋白性质与功能 6. DNA拓扑异构酶(topoisomerase) 分:拓扑异构酶 I和拓扑异构酶II 5′——TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG 3′ AACCCC 5′——TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG 3′ AACCCCAACCCC 5′——TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG 3′ AACCCCAACCCCAACCCC 七、DNA复制过程 根据计算,每一复制叉仅含1个DNA聚合酶Ⅲ全酶,这说明前导链和随后链上的DNA合成是由同一复制体负责的。但DNA两股链上的DNA合成不是同步进行的,并且方向相反,那么复制体是怎样工作的呢?为此提出了模型认为:当前导链上开始DNA合成和复制叉向前移动时,随后链即向后回折成环,并与聚合酶的另一个活性中心按前导链的取向缔合。在这样的结构中,PriA和DnaB蛋白是两个关键组分。 10.3 DNA损伤的修复 基因突变 胸腺嘧啶碱基在紫外光照射下,可以发生二聚加成反应: 在DNA分子中,如果两个胸腺嘧啶碱基相邻,在紫外光照射下,可能发生上述聚合反应,其结果是破坏了正常复制或转录。 修复方式: 一、光复合 光复合酶能特异地和嘧啶二聚体结合,在可见光下催化光化合反应,使环丁烷环回复到两个独立的嘧啶,这一过程叫光复合作用。 三、重组修复(Recombination rep
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