超高效液相色谱.doc

浙江经贸职业技术学院毕业论文（设计） PAGE 2 毕 业 论 文（设计） 题 目 畜禽肉中磺胺类药物残留的检测 指导老师 包永华 专业班级 食品营养与检测111 姓 名 陈亚楠 学 号 20117100132 　 2014年 5月 28 日 PAGE I 摘要: 实验采用超高效液相色谱-串联质谱的检测技术，测定畜禽肉中磺胺类药物的残留。样品采用乙腈作为提取溶剂，高速离心后清液，用旋转蒸发仪浓缩至近干，残渣用流动相溶解，并用正己烷脱脂后，试样供超高效液相色谱-串联质谱仪测定，并用基质外标法定量。将该检测技术应用于市售畜禽肉中磺胺类药物的检测，在猪肉样品中分别添加10、40、80 μg/kg三个不同浓度水平，各种磺胺类药物的回收率分别为80.2 %~121.6 %、84.2 %~117.2 %、91.6 %~101.2 %，RSD范围分别为0.6 %~13.0 %、1.7 %~12.9 %、0.6 %~4.5 %。鸡肉样品在10、40、80 μg/kg三个不同添加浓度水平下，各种磺胺类药物的回收率分别为82.2 %~112.2 %、83.2 %~108.7 %、94.7 %~105.7 %，RSD范围分别为3.8 %~8.5 %、4.8 %~8.6 %、4.9 %~7.9 %。实验结果表明：该方法基本满足日常畜禽肉样品中磺胺类药物残留的快速测定要求。 关键词：畜禽肉；磺胺；检测；超高效液相色谱-串联质谱仪 PAGE II 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u 引言 1 1材料与仪器 1 1.1试验材料 1 1.2仪器试剂 2 1.2.1仪器设备 2 1.2.2试剂 2 2实验方法 3 2.1前处理方法 3 2.2超高效液相色谱-串联质谱条件 3 2.2.1色谱条件 3 2.4.2质谱条件 4 3结果与分析 5 3.1色谱条件的优化 5 3.2线性范围、检出限和定量限 5 3.3回收率和精密度 8 3.4阳性样品的测试与方法比较 10 结论 10 参考文献 12 第PAGE 7页 引言 磺胺类药物是畜禽饲养过程中常用的抗菌、抗原虫药物，但不合理用药将导致磺胺类药物在动物性食品中无法分解，影响食品安全进而危害人类健康。当人类长期摄入含磺胺类药物的动物性食品后，药物不断在人体内蓄积[1]，当积累到一定程度后，就会对人体产生毒性作用[2]，特别是乙酰化磺胺在尿中溶解度低，析出结晶后对肾脏更大的损失，多数国家标准明文规定磺胺类中的磺胺脒(磺胺弧)是禁用药，多数磺胺药有严格的休药期规定。有临床研究报道：一定量的磺胺类药物残留能破坏人体的造血系统，引起溶血性贫血症、粒细胞缺乏、血小板减少症等，对过敏体质的人，轻者引起皮肤瘙痒症，重者引起血管性水肿，甚至导致死亡。故畜禽肉中磺胺类药物残留的监控受到高度重视，如何提高该类药物的残留检测技术尤其值得重视。 磺胺类药物在畜牧生产中应用十分广泛，在降低动物发病率、死亡率促进生长和改善动物产品品质方面的作用显著[3]。同时，此类药物低剂量使用时，可起到刺激动物生长的作用。另外，磺胺类药物的成本比较低，使用起来也很方便，据有关报道表明磺胺类药物种类已达数千种，其中应用较广并具有疗效的就有几十种。然而，通过任何途径摄入的磺胺类药物都会在人体中蓄积，导致多种细菌产生抗药性，对人类的身体健康产生很大的危害，因此，为了保障人民身体健康必须监控磺胺类药物在食品中的残留量[4]。 近年来，科学工作者对磺胺类药物在畜禽肉中残留作了大量研究，相应的检测技术也迅速发展，磺胺类药物残留的检测技术主要有：色谱法、分光光度法、高效毛细管电泳法、免疫分析法、荧光法、阻抑速差催化光速法等[5-7]。本研究意在寻求简便、快速、准确、敏感性高的检测方法，以满足日趋严格的残留限量要求。 1材料与仪器 1.1试验材料 猪肉，鸡肉：市场或超市购买。 1.2仪器试剂 1.2.1仪器设备 （1）AcquityTM超高效液相色谱-串联Quattro Premier XE质谱联用仪（美国Waters公司）； （2）Biofuge Stratos高速冷冻离心机（美国Thermo公司）； （3）台式微量高速离心机H1650-W （长江湘仪离心机仪器有限公司）； （4）旋转蒸发仪B-210（瑞士Buchi公司）； （5）纯水仪Milli-Q Gradient-Elix-5（美国Millipore公司）； （6）移液枪50μl 、200μl 、1000μl（美国Thermo公司）；