黄颡鱼仔稚鱼消化系统发育研究-渔业资源专业论文.docxVIP

华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 否 如需保密，解密时间 年 月 日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果．尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位 或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定．与我一同工作的同志对本研究 所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意． 研究生签名：高起 时间：弘11年6月7日 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照 学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电 子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印，缩印或扫描等复制--T段保存、 汇编学位论文．本人同意华中农业大学可以用-T同方式在-T同媒体上发表、传播学 位论文的全部或部分内容，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力． 注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的 论文)在解密后适用于本授权书． 学位论文作槲：高起 导㈣：杨拓多式 签名日期：参11年月．7日 签名日期： 珈l f年多月萝日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之问 2．3仔稚鱼消化腺发育组织学研究 2．3仔稚鱼消化腺发育组织学研究 3 2．3．1肝脏和胰腺 ．3 2．3．2胃腺 。4 3鱼类消化道粘液细胞的研究 ．．4 3．1鱼类消化道粘液细胞的种类及其功能 4 3．2消化系统中粘液细胞的分布 5 3．2．1口咽腔 ．5 3．2．2食道 ．．．_oo oooo： 6 3．2．3胃 6 3．2．4肠道 。7 3．3鱼类发育过程中消化系统粘液细胞的研究 7 4鱼类消化系统消化酶基因表达的研究 ．8 4．1鱼类消化系统胃蛋白酶原及—依+．ArP酶基因表达的研究 8 4．2鱼类消化系统胰蛋白酶原及胰凝乳蛋白酶原基因表达的研究 8 第二章黄颡鱼仔稚鱼消化系统的组织学研究 ．10 1材料与方法 ．．10 1．1试验鱼及其饲养 ．1 0 2．2组织学HE染色 1 0 华中农业大学2011届硕士研究生学位论文2．3 华中农业大学2011届硕士研究生学位论文 2．3 AB．PAS粘液细胞染色 11 3结果 ．．11 3．1黄颡鱼仔稚鱼口咽腔及食道的发育 。11 3．2黄颡鱼仔稚鱼胃的发育 ．．12 3．3黄颡鱼仔稚鱼肠道的发育 ．．13 zI讨论 ．： 13 4．1黄颡鱼消化道组织学发育 13 4．2黄颡鱼消化道粘液细胞发育 ．．1 5 第三章黄颡鱼仔稚鱼蛋白酶原基因表达的研究 28 l材料与方法 29 1．1试验鱼及其饲养 ．29 1．2实时荧光定量PCR 29 1．2．1总附叮A的提取 29 1．2．2反转录PCR及cDNA模板的制备 ．29 1．2．3胃蛋白酶原和}九K+．ATP酶基因亚克隆 30 1．2．4荧光定量PCR反应引物设计合成 ．30 1．2．5质粒标准品的制备 3 1 1．2．6实时荧光定量PCR反应 3 1 1．3数据统计学分析 ．．32 2结果 一32 2．1黄颡鱼仔稚鱼消化系统胃蛋白酶原和旷Ⅸ+．ATP酶基因表达 ．32 2．1．1黄颡鱼胃蛋白酶原和州-ATP酶基因亚克隆 32 2．1．2黄颡鱼仔稚鱼胃蛋白酶原和州-ATP酶基因表达 34 2．2黄颡鱼仔稚鱼消化系统胰蛋白酶原基因表达 ．．35 3讨论 ．．3f； 3．1黄颡鱼仔稚鱼胃蛋白酶原及}r厂K+．ATP酶基因表达 ．36 3．2黄颡鱼仔稚鱼胰蛋白酶原基因表达 ．．38 参考文献 ．．40 附勇乏 ．．50 致谢 。5 1 黄颡鱼仔稚鱼消化系统发育研究摘 黄颡鱼仔稚鱼消化系统发育研究 摘 要 黄颡鱼(Pelteobagrusfulvidraco)隶属于鲇形目、鳞科、黄颡鱼属，因其肉质 美而深受人们喜爱，近年来已在全国开展大规模的养殖，但在规模化苗种培育过 中仔稚鱼死亡率很高，严重制约了黄颡鱼养殖的发展。在课题组对黄颡鱼仔稚鱼 化系统发育进行了形态学、组织学及超微结构等方面的初步研究基础上，本研究 一步采用组织学及组织化学AB．PAS染色方法对黄颡鱼仔稚鱼消化道粘液细胞发 进行了研究，同时采用荧光定量PCR等分子生物学方法对黄颡鱼仔稚鱼消化系统 育过程中胃蛋白酶原、州．ATP酶及胰蛋白酶原基因表达进行了定量检测研究 以期掌握组织器官结构出现与功能完善过程，丰富黄颡鱼早期生活史的基础资料 同时也为规模化苗种培育制定合理的饵料投喂策略，提高仔稚鱼培育的成活率提供 理论依据。主要研究结果如下： l、采用组织学HE染色及组织化学AB．PAS染色，对黄颡鱼仔