植物激素提取项目总结.pptxVIP

植物激素提取项目总结汇报人： 高微一、实验内容二、实验结果三、突破方向一、实验内容通过2013年植物激素提取方法的摸索，初步确定提取过程为：样品→组织捣碎→离心→超声浸提→浸提→过滤测定， 2014年工作目的是要改进或者完善方法，提高提取液中植物激素的含量，工作内容主要包括以下两个方面：（一）、超声浸提1、样品前处理。样品前处理包括，直接采用鲜海藻酶解处理、将鲜 海藻进行酶解处理后冷冻干燥、及将鲜海藻反复冻融三种方法：①对比干燥样品，将鲜海藻研磨后加入碳酸氢钠和发酵液后在组织捣碎机中捣碎反应三十分钟，反应后将样品离心，下层固体用纯甲醇超声浸提一小时，再放入冰箱中浸提16小时，过滤，待测。 ②改进鲜海藻处理方法，将鲜海藻在冷冻干燥之前进行酶解处理，然后将此干燥样品研磨后加入碳酸氢钠和发酵液后在组织捣碎机中捣碎反应三十分钟，反应后将样品离心，下层固体用纯甲醇超声浸提一小时，再放入冰箱中浸提16小时，过滤，待测。 ③根据文献，改变鲜海藻处理方法，将鲜海藻进行反复冻融，所得海藻样品加入甲醇，超声一小时，再放入冰箱中浸提16小时，过滤，待测。 2、提取前处理。提取前处理是将酶解所用盐进行改变，考察前期处理中不同盐对提取结果的影响，采用磷酸二氢钾与发酵液做酶解处理，组织捣碎干燥样品，离心然后浸提，过滤，待测。 3、浓缩处理。提取液浓缩采用两种方法，减压蒸馏和冷冻干燥： ①将样品反复浸提，合并多次提取液，然后将提取液进行减压蒸馏，考察蒸馏浓缩对提取的影响。 ②对比减压蒸馏，拟采用冷冻干燥方法浓缩提取液，制备一定体积的植物激素提取液，进行冷冻干燥。 （二）、超临界提取 1、采用超临界萃取方法提取植物激素，提取条件：压力27.5Mpa、温度40℃、夹带剂100%甲醇（500mL）、样品为冷冻干燥鲜海藻粉碎(150g)、提取时间5小时。 2、改变提取条件：压力27.5Mpa、温度35℃、夹带剂80%甲醇水溶液（250mL）、样品为冷冻干燥鲜海藻粉碎(171g)、提取时间6小时。 3、改变提取样品，样品为冷冻干燥二次发酵液(112g)，其他条件：压力27.5Mpa、温度35℃、夹带剂80%甲醇水溶液（250mL）、提取时间5.5小时。 4、改变提取样品，样品为冷冻干燥酶解处理干燥鲜海藻(160g)，其他条件：压力27.5Mpa、温度35℃、夹带剂80%甲醇水溶液（200mL）、提取时间5.5小时。二、实验结果 提取液 (ppm)玉米素 玉米素核苷 异戊烯基腺嘌呤异戊烯基腺嘌呤核苷鲜海藻酶解浸提鲜海藻酶解冻干浸提鲜海藻冻融浸提钾盐酶解处理浸提减压蒸馏钠盐酶解处理浸提100%甲醇超临界提取80%甲醇超临界提取冻干发酵液超临界提取冻干酶解海藻超临界提取ND0.0240.1500.450ND0.395ND0.0130.0800.056ND0.040ND0.232ND0.164NDND0.2200.200ND0.057ND0.132ND0.4360.0850.1500.1480.030ND0.270ND0.570ND0.2660.0710.0590.0300.2071、对比检测结果，鲜海藻不经过冷冻干燥处理，提取效果不佳，原因可能是细胞壁破坏程度不够，直接导致提取效果差；鲜海藻冻干前进行酶解处理也未能改进提取结果，而且冻干前的酶解过程可能对植物激素造成一定程度的破坏；反复冻融鲜海藻对细胞壁破坏程度不够，直接导致提取结果不佳。 2、对比钠盐，采用钾盐进行冻干海藻进行酶解前处理，二者差异不大。 3、但减压蒸馏到一定程度，提取液体积保持不变，蒸馏过程未达到预期目标，而且蒸馏过程可能对提取液中激素造成破坏。 4、但由于冷冻过程无法达到提取液凝固点，浓缩中断，因此未达到浓缩目的。 5、超临界提取时，选用80%甲醇水溶液较纯甲醇提取效果好，因此之后实验以80%甲醇水溶液做夹带剂，冻干发酵液和冻干酶解处理海藻提取结果差异不大，但明显高于冻干海藻。 三、突破方向1、提取液浓缩（冷冻干燥、氮气吹干）2、超临界压力3、外文文献查阅 请各位领导和同事指正 谢 谢！