高中生物菊花的组织培养 (6).pptVIP

1、制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备。 1）配制各种母液 ①无机物：大量元素浓缩10倍， 微量元素浓缩100倍， 常温保存 ②有机物：激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量 2）配制培养基 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml。 ① 配制培养基 ② 调PH ③ 分装 注意：由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素。 琼脂融化 蔗糖 无机物、有机物的母液 蒸馏水 + + + 3）灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌。 1）选材：选取菊花茎段时，要取生长旺盛的嫩枝 2、外植体消毒 2）消毒： ①流水冲洗 ②酒精处理 ③消毒液处理 流水冲洗 + 洗衣粉刷洗 流水冲洗20min左右 + 无菌吸水纸吸干 70%酒精中2~3次，6~7s 无菌水清洗 + + 无菌吸水纸吸干 0.1%氯化汞中1~2min 无菌水清洗至少3次 + + 3、接种 空气消毒——70％的酒精喷雾 工作台——70％的酒精擦拭 1）接种室消毒 2）无菌操作要求 ①所有接种操作都必须在酒精灯火焰旁进行。 ②每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。 3）材料的切取和接种 将