糖尿病环境下miR-126对内皮祖细胞归巢的调控.pdfVIP

万方数据 摘 要 目的： 糖尿病内皮祖细胞（EPCs ）存在内皮修复功能障碍，CXCR4 表达下调致 SDF-1α/CXCR4 调控障碍是糖尿病机体EPCs 归巢损伤的重要机制。我们前期研究 发现，糖尿病患者EPCs 上miR-126 低表达降低EPCs 迁移、增殖，增加凋亡。本 研究进一步探讨影响 EPCs 上miR-126 表达的糖尿病环境（高血糖、终末期糖基 化产物、ROS 、炎症因子表达），及miR-126 调控SDF-1α/CXCR4 相关EPCs 归巢 的作用和相关信号机制。 方法： 第一部分，在一定的高糖和AGEs 实验浓度下，检测EPCs 上miR-126 的表达， 进一步探讨AGEs 调控miR-126 表达的相关机制。 第二部分，筛选合适的SDF-1α 实验浓度，在一定的实验浓度下，SDF-1α 诱导检 测 EPCs 上 CXCR4 表达水平和迁移能力，并探讨 miR-126 调控 SDF-1α/CXCR4 轴相关EPCs 归巢的信号机制。 结果： 第一部分研究发现高糖孵育EPCs 24h ，EPCs 上ROS 、IL-6 和TNF-α 水平升高， 48h 以后，miR-126 表达下降，AGEs 提高EPCs 上ROS ，IL-6 和TNF-α 水平，降 低miR-126 的表达；过表达miR-126 能减少高糖或AGEs 诱导的ROS 、IL-6 和TNF-α 水平，而抑制miR-126 表达，则促进高糖或AGEs 诱导的ROS 、IL-6 和TNF-α 表 达水平；AGEs 通过PI3K/Akt 信号通路调控miR-126 表达。 第二部分研究发现随着 SDF-1α 浓度的升高，EPCs 迁移数量增多；抑制miR-126 表达时，CXCR4 的表达减少，EPCs 迁移数量明显减少，miR-126 过表达时，CXCR4 的表达增多，EPCs 迁移数量显著增加；miR-126 可能通过PI3K/Akt/eNOS 和VEGF 信号通路调控EPCs 上CXCR4 的表达。 I 万方数据 结论： 高血糖和AGEs 可能通过下调PI3K/Akt 降低EPCs 上miR-126 的表达，导致糖尿 病环境EPCs 的功能障碍。糖尿病环境EPCs 上miR-126 表达不足，可能通过下调 PI3K/Akt/eNOS 和VEGF 信号通路导致EPCs “归巢”功能损伤。因此，miR-126 可能是研究糖尿病EPCs 损伤的重要靶点之一。 关键词:糖尿病；AGEs ；microRNA-126；内皮祖细胞；SDF-1α II 万方数据 ABSTRACT Purpose ： The endothelium-regenerative ability of EPCs is impaired in patients with type-2 diabetes mellitus (DM). MicroRNAs (miRNAs) are key regulators of diverse cellular processes including angiogenesis. Down-regulated expression of CXCR4 in EPCs and the subsequent SDF-1α/CXCR4 signal transcriptional disorder are currently recognized as a major mec