课件：三免疫学检测技术.pptVIP

竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。 竞争ELISA检测抗原 5、 捕获包被法测抗体或IgM抗体捕捉ELISA IgM的检测常用于传染病的诊断。用抗人IgM抗体包被固相，以捕获血清标本中的IgM（其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM），再加抗原和酶标2抗。此法常用于病毒性感染的早期诊断。 6、桥联法 或称抗酶抗体法或不标记抗体酶法。常见的是HRP抗HRP法，AP抗AP法。 首先用酶（如HRP）和抗原免疫同一种动物分别制备针对抗原和酶的抗体（Ab1和Ab3）；以制备 Ab1和Ab3动物的IgG免疫另一种动物，制备Ab2； Ab2与Ab1和Ab3反应产生Ab1 Ab2 Ab3复合物，其中Ab2起桥梁作用；待测标本含有与Ab1相应的抗原，反应可生成Ag Ab1 Ab2 Ab3 酶 复合物，加底物即可检测。 过程： 已知抗体包被 加待测样品，洗涤 加Ab1，洗涤 加Ab2，洗涤 加酶-酶抗体 底物 此外，目前比较流行的生物素、亲和素、SPA蛋白